| 更新時間： | 2025-02-06 |
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| 廠商性質： | 生產廠家 |
禽流感H5抗體(ti) 金標檢測卡*中垂詢！
禽流感病毒（H5N1）抗體(ti) 檢測試劑盒
介紹
禽流感病毒(H5N1)抗體(ti) 檢測試劑盒檢測雞血清中的禽流感病毒H5N1抗體(ti) ，用於(yu) 評估養(yang) 雞場雞禽流感疫苗免疫狀況及感染雞的血清學輔助診斷。
本試劑盒采用間接ELISA法，在酶標板微孔上預包被禽流感H5N1抗原。在試驗中，加入稀釋後的待檢血清，經過溫育後，若樣品中含有禽流感H5N1特異性抗體(ti) ，則與(yu) 包被板上的抗原結合，經洗滌除去未結合的抗體(ti) 和其他成分後；加入酶標二抗，與(yu) 檢測板上的抗原抗體(ti) 複合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶結合物；在微孔中加入TMB底物液，經酶催化形成藍色產(chan) 物，加入終止液終止反應後，用酶標儀(yi) 450nm波長測定反應孔中的吸光度A值。
需自備的設備及試劑
1. 微量移液器： 0.5µl～10µl、10µl～100µl、100µl～1000µl。
2. 一次性移液器吸頭。
3. 量筒：500ml。
4. 96孔板酶標儀(yi) 。
5. 蒸餾水或去離子水。
6. 洗瓶或洗板機。
樣品製備
取動物全血，按常規方法製備血清，要求血清清亮，無溶血。
洗滌液的準備
濃縮洗滌液使用前應恢複至室溫，如有鹽結晶，搖動使結晶的鹽溶解，然後用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。
樣品的稀釋
在血清稀釋板中按1：101的體(ti) 積比稀釋待檢血清（例如：200μl樣品稀釋液中加2μl待檢血清）。
注意：陰性和陽性對照不用稀釋。取每個(ge) 樣品後都要更換吸頭，準確記錄每個(ge) 樣品在板上的位置。每個(ge) 樣品在加入到包被板微孔前應充分混勻。
注意事項
1. 試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫，使用前應搖勻，使用後放回2～8℃。
2. 不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用，使用試劑時應防止試劑汙染。
3. 底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性，使用時應該注意防護。
4. TMB（底物B液）不要暴露於(yu) 強光和避免接觸氧化劑。
5. 檢測板拆封後應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加幹燥劑放於(yu) 自封袋中，並盡快置於(yu) 2～8℃)。
6. 所有廢棄物在丟(diu) 棄之前應合理處理以免汙染。
7. 嚴(yan) 格遵守操作說明可以獲得H的結果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須精q。
8. 血清稀釋板為(wei) 一次性用品，不得重複使用；血清稀釋板的大容量為(wei) 300μl/孔。
操作步驟
1. 取預包被的檢測板（根據樣品多少，可拆開分次使用），將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設陰性、陽性及空白對照各1孔，取陰性及陽性對照各100μl
分別加入反應孔中，空白對照僅(jin) 加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出）。
2. 蓋上封板膜，置37℃溫育30分鍾。
3. 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔（約350μl），靜置1分鍾後甩掉。洗滌3次後在幹淨吸水紙上拍幹。
4. 每孔加酶結合物100μl，蓋上封板膜，置37℃溫育30分鍾。
5. 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗滌3次, 方法同2。切記後在幹淨吸水紙上拍幹。
6. 每孔先加底物A液50µl、再加底物B液50µl，混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鍾。
7. 每孔加終止液50μl，使反應終止，10分鍾內(nei) 測定結果。
結果判定
以空白對照調零用酶標儀(yi) 於(yu) 450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度A值。試驗成立的條件是陽性對照孔A450值大於(yu) 或等於(yu) 0.5，陰性對照孔A450值必須小於(yu) 0.15。如果試驗無效，試驗中的操作值得懷疑，試驗應重做，並仔細檢察各組分。
樣品A450值大於(yu) 0.15+陰性對照孔均值，判為(wei) 陽性；樣品A450值小於(yu) 0.15+陰性對照孔均值，判為(wei) 陰性；如陰性對照孔均值小於(yu) 0.05按0.05計算。
有效期
貯存方法： 2 - 8ºC下貯存。
有效期： 12個(ge) 月。
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