| 更新時間： | 2025-02-06 |
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| 廠商性質： | 生產廠家 |
豬偽(wei) 狂犬病毒抗體(ti) 診斷試劑盒（酶聯免疫法）*中垂詢！
豬偽(wei) 狂犬病毒抗體(ti) 診斷試劑盒（酶聯免疫法）
說明書(shu)
【產(chan) 品名稱】
通用名稱：豬偽(wei) 狂犬病毒抗體(ti) 診斷試劑盒（酶聯免疫法）
英文名稱：Diagnostic Kit For Antibodies To
Swine Pseudorabies Virus（PRV Ab）,ELISA
【規格】
96T×2/盒
【預期用途】
本試劑盒主要目的是測定豬血清中豬偽(wei) 狂犬病毒抗體(ti) 。可用於(yu) 評估感染豬的血清學診斷以及豬偽(wei) 狂犬病毒的流行病學調查、豬群豬偽(wei) 狂犬病毒疫苗免疫狀況分析。但試劑盒所測結果不能用於(yu) 作為(wei) 區分免疫抗體(ti) 和感染抗體(ti) 的指標，若想確認是疫苗還是野毒感染產(chan) 生的抗體(ti) 需結合臨(lin) 床資料、免疫狀況及其他診斷方法綜合進行分析。
【檢驗原理】
本試劑盒應用固相酶聯免疫吸附試驗（ELISA）原理，由包被有高純度的豬偽(wei) 狂犬病毒抗原的微孔反應板、辣根過氧化物酶標記的抗豬IgG及其它試劑配套組成。其反應機理為(wei) 包被抗原與(yu) 樣本中的PRV-Ab結合，再與(yu) 酶標抗豬IgG抗體(ti) 形成“包被抗原+PRV-Ab+酶標抗豬IgG抗體(ti) ”複合物，加入顯色劑，通過酶催化反應顯色。顯色深淺與(yu) PRV-Ab的量成正比，當樣本反應顯色後，經酶標儀(yi) 檢測所得結果超過設定的臨(lin) 界值時結果判為(wei) 陽性，即表明免疫產(chan) 生了抗體(ti) 或有自然感染存在。
【主要組成成份】
1 | PRV抗原包被板 | 96T×2 | |
2 | 酶標記物 | 22ml | 黃色帽 |
3 | 樣本稀釋液 | 50ml | 透明帽 |
4 | PRV-IgG陰性對照血清 | 1.5ml | 綠色帽 |
5 | PRV-IgG陽性對照血清 | 1.5ml | 紅色帽 |
6 | 顯色劑 | 12ml×2 | 橙色帽 |
7 | 終止液 | 12ml | 藍色帽 |
8 | 20X濃縮洗滌液 | 50ml | 白色帽 |
9 | 蓋板膜 | 2張 |
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10 | 說明書(shu) | 1份 |
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【自備器材】
1．酶標儀(yi) ，雙波長450/630nm濾光片
2．精q的微量移液器（單道1-100ul、0.5-10ul、多道30-300ul）
3．水浴箱或恒溫箱
4．微量振蕩器
5．洗液吸移裝置
6．一次性槍頭（10ul，200ul）
7．去離子水
【樣本要求】
1．本試劑檢測的樣本為(wei) 豬血清，樣本應無菌采集，2℃～8℃貯存應不超過一周，長期應在-20℃以下保存。
2．避免使用嚴(yan) 重溶血、有沉澱物、含懸浮纖維蛋白及汙染長菌及含疊氮鈉血清樣本。
3．樣本中含有常規用量的EDTA、枸櫞酸鈉或肝素鈉等抗凝劑不影響本實驗。
【實驗準備】
1．試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實驗前，先取出置室溫30min，可以獲得j結果。
2．樣本稀釋：用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作40倍稀釋（加入樣本後溶液顏色會(hui) 有變化），稀釋的樣本混合均勻能取得較好結果。
3．配製洗滌液：將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋20倍，即可使用。
【檢驗方法】
1．加樣：根據樣本數量，取所需板條，檢測時，設陰、陽性對照各2孔，分別加入不用稀釋的陰、陽性對照血清100μl於(yu) 相應孔中。其餘(yu) 為(wei) 樣本孔，每孔加100μl用樣本稀釋液稀釋好的樣本（可做單孔也可雙孔檢驗）。
2．溫育：加樣後，蓋上蓋板膜，置37℃溫育30分鍾。
3．洗板：甩去孔內(nei) 液體(ti) ，用洗滌液注滿反應板孔，無需靜置，直接甩出，洗滌3次，後一次洗滌後吸幹板內(nei) 液體(ti) 。
4．加酶：每孔加酶標記物100μl。
5．溫育：加好酶標記物的反應板蓋好蓋板膜，置37℃溫育30分鍾。
6．洗板：同步驟3。
7．顯色：每孔加顯色劑100μl，振蕩混勻，37℃避光反應10分鍾。
8．終止：每孔加終止液50μl，振蕩10秒，充分混勻，終止後即讀數。
9．讀數：以450nm/ 630nm雙波長檢測，讀取各孔吸光度值（OD值）。
【結果判定】
在酶標儀(yi) 上測各孔的OD值。檢測結果有效的條件是陽性對照孔的平均OD值≥0.6，陰性對照孔的平均OD值必須＜0.1；樣品中抗體(ti) 存在與(yu) 否，或樣本中抗體(ti) 的相對水平的高低由S/P值決(jue) 定，S/P值計算時按以下方式處理:
S/P=(樣本OD450/630值-NCx(—))/（PCx(—)-NCx(—))，其中NCx(—)表示陰性對照孔平均OD450/630值，PCx(—)表示陽性對照孔平均OD450/630值；
當樣本的S/P≥0. 2時判為(wei) 陽性；樣品S/P值＜0.2時判為(wei) 陰性；
樣本中抗體(ti) 相對水平——效價(jia) （ET），其與(yu) S/P的關(guan) 係如下：
lg（ET的倒數）==0.7628x + 1.5468
x=S/P值。
此效價(jia) 是根據實驗室目前對PRV檢測方法和免疫的抗體(ti) 反應兩(liang) 方麵綜合而定；在免疫時效檢測和記錄有代表性樣本的抗體(ti) 效價(jia) 是對豬群的免疫狀況的hao評價(jia) ，得出的豬群狀況可對免疫全程中抗體(ti) 滴度的分布和變化進行分析。
若進行大量樣本檢測時，可使用試劑盒專(zhuan) 業(ye) 分析軟件進行分析數據結果，該軟件可登陸本公司*網站下載。
【檢驗結果的解釋】
1．嚴(yan) 重溶血、血清中纖維蛋白分離不充分、含紅血球樣本可能導致假陽性；有血脂樣沉澱或長菌的樣本可能導致假陰性。
2．因個(ge) 體(ti) 差異或免疫時間長短等因素可能會(hui) 出現個(ge) 別豬隻免疫疫苗後檢測結果為(wei) 陰性。
3．陽性結果用於(yu) 感染豬的血清學診斷以及流行病學調查時需結合其他診斷方法和臨(lin) 床資料進行分析。
【產(chan) 品性能指標】
1．特異性：以本品檢測參比血清，符合率達100%。
2．靈敏度：本試劑盒檢測方法的靈敏度G可達1：5120。
3．重複性：不同批次間CV（%）不高於(yu) 8%。
4．穩定性：試劑盒在2℃～8℃放置6個(ge) 月或37℃放置3天，測定結果達到以上1-3標準。
【注意事項】
1．本試劑盒僅(jin) 供研究使用。
2．不要使用過期的試劑盒組分，不要把不用批次的組分混合使用。
3．使用試劑盒之前，一定要仔細閱讀說明書(shu) 。
4．本試劑盒應按含有傳(chuan) 染性材料對待，試驗廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鍾，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鍾後廢棄。
5．微孔板從(cong) 冷藏環境中取出時應在室溫中平衡至潮氣幹盡後方可拆開，未用完的微孔板須放回有幹燥劑的鋁箔袋並密封2℃-8℃保存。未用完的液體(ti) 試劑應蓋好瓶蓋，與(yu) 其它配套組份放入試劑盒中於(yu) 2℃-8℃避光保存。
6．若20倍濃縮洗滌液出現結晶，屬正常現象，放置37℃至溶解後即可。
7．應用微量移液器加入樣本及試劑，並經常校對其準確性。
8．加洗滌液時應做到滿而不溢，防止孔口有遊離酶不能洗淨或各孔間的交叉汙染。
9．終止液有腐蝕性，若濺到皮膚或衣物上應立即用大量清水衝(chong) 洗幹淨。
【儲(chu) 存條件及有效期】
於(yu) 2℃～8℃避光保存，防止冷凍，有效期6個(ge) 月。
【生產(chan) 日期及批號】
詳見包裝袋和外包裝盒。
豬圓環病毒2型抗體(ti) 診斷試劑盒
豬偽(wei) 狂犬gE鑒別抗體(ti) 檢測試劑盒
高致病性豬藍耳病病毒核酸熒光PCR檢測
