| 更新時間： | 2025-02-06 |
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| 廠商性質： | 生產廠家 |
提供商：上海研謹生物/杭州研謹生物服務名稱：免疫共沉澱（CHIRP）實驗規格：實驗服務價(jia) 格：2000元周期：1-3個(ge) 月
免疫共沉澱（Co-Immunoprecipitation）是以抗體(ti) 和抗原之間的專(zhuan) 一性作用為(wei) 基礎的用於(yu) 研究蛋白質相互作用的經典方法，是確定兩(liang) 種蛋白質在完整細胞內(nei) 生理性相互作用的有效方法。免疫共沉澱具有經翻譯後修飾的，處於(yu) 天然狀態的優(you) 點。
免疫共沉澱（CHIRP）實驗意義(yi)
IncRNA可與(yu) 蛋白質、DNA和RNA相互作用，實現多樣化功能，CHIRP可以探討IncRNA與(yu) 其互作的DNA.蛋白質的功能與(yu) 作用機製，是相關(guan) 科學研究工作的有力工具。IncRNA的研究在表觀遺傳(chuan) 調控等生命活動中發揮重要作用，CHIRP是研究
IncRNA的重要技術手段，可在全基因組範圍內(nei) 鑒定RNA與(yu) 染色質的互作，並對其進行定性、定量及定位的分析。
免疫共沉澱（CHIRP）實驗原理
CHIRP (Chromatin Isolation by RNA Purification)是通過結合生物素的核酸探針，將目標RNA拉下來,與(yu) 之共同作用的DNA染色體(ti) 片段(DNA與(yu) 蛋白質複合體(ti) )就會(hui) 被吸附下來，後可以通過qRT-PCR. WB.測序分析和質譜分析等檢測RNA. DNA和蛋白質。
CHIRP的實驗流程
①探針設計:設計反義(yi) 穿核苷酸探針:
②細胞培養(yang) ;
③破碎細胞:
④生物素標記的DNA探針與(yu) RNA雜交;
⑤CHIRP;
⑥RNA、DNA及核酸結合蛋白提取; .
⑦分析檢測。,
結果展示
實驗完成周期及交付標準
1.實驗周期: 1-3個(ge) 月
2.交付標準: CHIRP鑒定結果報告、分析報告、實驗報告(試劑、 耗材、實驗步驟)、原始數據等
實驗需與(yu) 客戶確認的信息
1.目的基因與(yu) 蛋白信息。
2.樣本類型與(yu) 種屬
3.是否需要生信分析
注意的問題：
（1）細胞裂解采用溫和的裂解條件，不能破壞細胞內(nei) 存在的所有蛋白質－蛋白質相互作用，多采用非離子變性劑（NP40或Triton X-100)。每種細胞的裂解條件是不一樣的，通過經驗確定。不能用高濃度的變性劑（0.2%SDS)，細胞裂解液中要加各種酶抑製劑，如商品化的cocktailer。
（2）使用明確的抗體(ti) ，可以將幾種抗體(ti) 共同使用。
（3）使用對照抗體(ti) ：
單克隆抗體(ti) ：正常小鼠的IgG或另一類單抗
兔多克隆抗體(ti) ：正常兔IgG
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