| 更新時間： | 2025-02-05 |
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| 廠商性質： | 生產廠家 |
提供商：上海研謹生物服務名稱：核仁組成區嗜銀-AGNOR染色技術服務規格：樣本價(jia) 格：60元收費標準/服務周期/提供結果:歡迎谘詢詳談，我們(men) 會(hui) 根據您的方案及需求製定詳細的服務協議。更多實驗技術服務請瀏覽網站其他內(nei) 容,或來電詳詢!
核仁組成區嗜銀-AGNOR染色技術服務
一.核仁組成區嗜銀-AGNOR染色技術服務簡介
核仁組成區(NORs)是染色體(ti) 上的一個(ge) 編碼核糖體(ti) RNA(rRNA)的片段，存在於(yu) DNA特異性環上，凸向核仁。在電鏡下，核仁組成區為(wei) 在電子致密區中的境界不清的淺染區域。在石蠟切片上,在核仁中見到的每一個(ge) 點狀反應顆粒有可能代表多 個(ge) AgNOR位點。核仁組成區嗜銀蛋白染色主要特點是操作簡便、批量染色的較為(wei) 經濟, AgNOR位點的數量增加與(yu) 細胞增殖性增加有關(guan) ，對於(yu) 良惡性腫瘤的鑒別具有一定的意義(yi) 。
二、試劑配製
1. AgNOR染色液
甲液:明膠2 g溶於(yu) 雙蒸水至99 ml,在60°C使之*溶解，再加入純甲酸1 ml搖勻待用。
乙液: AgNO350 g溶解於(yu) 雙蒸水中至100 ml, 4°C冰箱保存。
2. AgNOR工作液
取甲液10 ml,乙液20 ml臨(lin) 用前混合。
三、染色步驟
1.切片脫蠟至水
2.雙蒸水洗2次
3.AgNOR工作液中(25°C) 浸染30分鍾(暗處進行) (鏡下觀察)
4.脫水，透明，封固
5結果:油鏡觀察，細胞核及胞質背暴為(wei) 淡黃色，AgNOR呈棕黑色顆粒狀。
四、樣本說明
1、 石蠟切片
取材: 1.組織離體(ti) 後需及時固定; 2.組織標本不宜過大、過厚。
固定: 1.固定液: 10%福爾馬林(4%Paraformaldehyde) 或10%中性甲醛: 2.用量: -般固定液的量與(yu) 組織體(ti) 積比為(wei)
10:1~20:1; 3. 固定:適宜的固定時間，主要根據材料的大小鬆密程度及固定液的穿透速度而定。
保存:切片經60°C烤片3-5小時後，可於(yu) 常溫或4°C幹燥保存。
2.冰凍切片
取材:取材後需立即置於(yu) 超低溫冰箱或液氮中保存。
固定:樣本冰凍切片後，應立即放入甲醇、acetone. 95%酒精、 4%Paraformaldehyde等固定液中固定。
保存:固定好的切片自然風幹，密封後置於(yu) -80°C. -20°C保存， 盡快用於(yu) 後續實驗。
3.細胞塊石蠟切片
細胞量較多的樣品，可離心分離所需細胞，用中性甲醛固定後製作成瓊脂細胞塊，然後按照製作石蠟切片的操作流程進行切
片。
4、細胞爬片
在孔板裏做的細胞爬片，爬片取出後，用PBS洗滌2次(根據研究目的，PBS洗滌可選擇不做)。用4%Paraformaldehyde49C固定15分鍾，將表麵液體(ti) 吹幹，置於(yu) -20°C保存。若在短時間內(nei) 即開展實驗,可在加固定液後，於(yu) 4°C冰箱中放置一段時間。
5.細胞塗片細胞塗片常用的固定液有95%酒精(為(wei) 常用)、酒精 Glacial acetic acid solution. Ethyl ether-酒精液和
Carney's液等。
五、注意事項
1.常用的固定液為(wei) 中性甲醛和4%Paraformaldehyde, 能使大多數抗原保存良好，適用於(yu) 免疫組織化學。
2.病理實驗切片好是防脫片，以免實驗過程中出現掉片。若客戶提供切片，應告知切片有無防脫處理。
3.骨組織、皮膚組織或脂肪含量較高的樣本,實驗過程中有較高的掉片幾率。
4.客戶可提供組織塊(以10%福爾馬林、4%Paraformaldehyde或10%中性甲醛固定， 如組織塊極小請事先說明) . 蠟塊
或切片(使用bv官网中国官方网站切片，以避免實驗過程中掉片)
5.待檢測蛋白的種屬、實驗分組情況及實驗背景資料、其他具體(ti) 要求等需事先說明。
6.若客戶提供骨組織或鈣化程度較高的組織進行實驗，需進行脫鈣處理。
7.浸泡在固定液中的組織樣本，在運輸中容器需密封，防止破碎、滲漏。
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