細胞名稱        L-02人肝細胞 

種屬            人 

組織來源          肝 

生長狀態          貼壁生長 

培養(yang) 條件          培養(yang) 基類型：DMEM培養(yang) 基 

              FBS:10% 

              抗生素：雙抗 

              培養(yang) 條件：37℃，CO2:5% 

傳(chuan) 代方法          收到細胞後，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態： 

                  如果沒長滿，將培養(yang) 瓶用75%酒精消毒後在超淨台內(nei) 更換新鮮 

              培養(yang) 液，繼續培養(yang) 。 

                  如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳(chuan) 代後繼續培養(yang) 。 

              貼壁細胞傳(chuan) 代方法： 

              1棄去培養(yang) 基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。 

              2加1ml0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與(yu) 大部分細胞接觸 

              後放入37℃培養(yang) 箱內(nei) ，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變 

              圓後加*培養(yang) 基終止消化。 

              懸浮細胞傳(chuan) 代方法：可以直接傳(chuan) 代也可以離心法傳(chuan) 代。 

              1直接傳(chuan) 代是讓懸浮細胞慢慢沉澱在瓶底後，將上清吸掉1/2-2/3， 

              吹打細胞形成細胞懸液後，分別接種到其他培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中繼續 

              培養(yang) 。 

              2離心法傳(chuan) 代是將細胞連同培養(yang) 液一並轉移到離心管內(nei) ，1000rpm， 

              5分鍾，去除上清，加新的培養(yang) 液到離心管內(nei) ，吹打細胞形成細胞 

              懸液後，分別接種到其他培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。 

               一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳(chuan) 二。 

凍存方法          70%*培養(yang) 基，20%FBS，10%DMSO，現用現配。 

              儲(chu) 存：液氮中長期保存。 

注             1觀察細胞在低倍鏡下觀察，便於(yu) 整體(ti) 估計細胞密度。 

              2在運輸過程中可能會(hui) 導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落，可 

              離心吹打後重新種入瓶中培養(yang) 。 

              3收到細胞後若發現培養(yang) 瓶破損、細胞汙染等，請在一周內(nei) 與(yu) 我們(men)  

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