| 更新時間： | 2025-02-04 |
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| 廠商性質： | 生產廠家 |
小鼠白三烯B4(LTB4)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒價(jia) 格公道、*，售後服務完整，並提供免費代檢測服務！白三烯本試劑盒用於(yu) 測定小鼠血清，血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中白三烯(LTB4)的含量。
小鼠白三烯B4(LTB4)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒
白三烯本試劑盒用於(yu) 測定小鼠血清，血漿及相
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中小鼠白三烯B4(LTB4)水平。用純化的小鼠白
三烯B4(LTB4)抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中依次加入白三烯B4
(LTB4)，再與(yu) HRP標記的白三烯B4(LTB4)抗體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，
經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下
轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白三烯B4(LTB4)呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm
波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中小鼠白三烯B4(LTB4)濃度。
白三烯試劑盒組成：
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書(shu) 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1個(ge) 1個(ge)
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品：225ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標試劑 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
20倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 30ml×1瓶 2-8℃保存
白三烯樣本處理及要求：
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鍾，離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上
清，保存過程中如出現沉澱，應再次離心。
2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為(wei) 抗凝劑，混合10-20分鍾後，
離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清，保存過程中如有沉澱形成，應該再
次離心。
3.尿液：用無菌管收集，離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清，保存過程中
如有沉澱形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養(yang) 上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/
分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nei) 的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃
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度達到100萬(wan) /ml左右。通過反複凍融，以使細胞破壞並放出細胞內(nei) 成份。離心20分鍾
左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
5.組織標本：切割標本後，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將
標本勻漿充分。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待檢測，
其餘(yu) 冷凍備用。
操作步驟
1. 標準品的稀釋與(yu) 加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標
準品100μl，然後在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然後從(cong) *孔、第二
孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，
混勻；然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻後從(cong) 第五、第六孔中各
取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混
勻後從(cong) 第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液50μl，混勻後從(cong) 第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋後各孔加樣量都為(wei) 50μl，
濃度分別為(wei) 150ng/L，100ng/L，50ng/L，25ng/L，12.5ng/L)。
2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl(樣
品zui終稀釋度為(wei) 5倍)。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混
勻。
3. 溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此
重複5次，拍幹。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15分鍾.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止
液後15分鍾以內(nei) 進行。
白三烯注意事項：
1．試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，並經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控製在5分鍾內(nei) ，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做複孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值
大於(yu) 標準品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定，計
算時請zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5．封板膜隻限一次性使用，以避免交叉汙染。
6．底物請避光保存。
7．嚴(yan) 格按照說明書(shu) 的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.
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8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與(yu) 英文說明書(shu) 有異，以英文說明書(shu) 為(wei) 準。
計算：
以標準物的濃度為(wei) 橫坐標，OD值為(wei) 縱坐標，
在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋
倍數；或用標準物的濃度與(yu) OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數，即為(wei) 樣品的實際濃度。
(此圖僅(jin) 供參考)
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與(yu) 預期濃度相關(guan) 係數R值為(wei) 0.990以上。
2.批內(nei) 與(yu) 批見應分別小於(yu) 9%和11%
檢測範圍：
5ng/L-200ng/L
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(ge) 月
人白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒
人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒
人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒
