| 更新時間： | 2025-02-03 |
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| 廠商性質： | 生產廠家 |
大鼠肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白C(SP-C)酶聯免疫分析價(jia) 格公道、*，售後服務完整，並提供免費代檢測服務！肺表麵活性本試劑盒用於(yu) 測定大鼠血清，血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白C(SP-C)的含量。
大鼠肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白C(SP-C)酶聯免疫分析(ELISA) 試劑盒使用說明書(shu)
肺表麵活性本試劑盒用於(yu) 測定大鼠血清，血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白C(SP-C)的含量。
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中大鼠肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白 C(SP-C)水平。
用純化的大鼠肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白 C(SP-C)抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被
單抗的微孔中依次加入肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白 C(SP-C)再與(yu) HRP 標記的 SP-C抗體(ti) 結
合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物 TMB顯色。TMB在HRP 酶
的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肺表麵活
性物質相關(guan) 蛋白 C(SP-C)呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在 450nm 波長下測定吸光度(OD值)，通
過標準曲線計算樣品中大鼠肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白 C(SP-C)濃度。
肺表麵活性試劑盒組成：
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書(shu) 1 份 1 份
封板膜 2 片(48) 2 片(96)
密封袋 1 個(ge) 1 個(ge)
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品：45ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存
標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶標試劑 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存
顯色劑A 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存
顯色劑B 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8℃保存
終止液 3ml ×1 瓶 6ml ×1 瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1 瓶 (20ml×30倍)×1 瓶 2-8℃保存
肺表麵活性樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鍾，離心 20分鍾左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上
清，保存過程中如出現沉澱，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為(wei) 抗凝劑，混合 10-20 分鍾後，離心
20分鍾左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清，保存過程中如有沉澱形成，應該再次
離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心 20分鍾左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清，保存過程
中如有沉澱形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yang) 上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20分鍾左右(2000-3000 轉/
分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nei) 的成份時，用PBS (PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞
濃度達到100 萬(wan) /ml 左右。通過反複凍融，以使細胞破壞並放出細胞內(nei) 成份。離心 20分
2
鍾左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本後，稱取重量。加入一定量的PBS ，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化後仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS (PH7.4)，用手工或勻漿器
將標本勻漿充分。離心 20分鍾左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待
檢測，其餘(yu) 冷凍備用。
6. 標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上
進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的(HRP )活性。
肺表麵活性操作步驟
1. 標準品的稀釋與(yu) 加樣：在酶標包被板上設標準品孔 10孔，在*、第二孔中分別加標
準品100μl，然後在*、第二孔中加標準品稀釋液 50μl，混勻；然後從(cong) *孔、第二
孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，
混勻；然後在第三孔和第四孔中先各取 50μl 棄掉，再各取 50μl 分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul ，混勻；混勻後從(cong) 第五、第六孔中各
取50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl，混
勻後從(cong) 第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液50μl，混勻後從(cong) 第九第十孔中各取 50μl 棄掉。(稀釋後各孔加樣量都為(wei) 50μl，
濃度分別為(wei) 30ng/L ，20ng/L ，10ng/L ，5ng/L， 2.5ng/L )。
2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品 10μl(樣
品zui終稀釋度為(wei) 5 倍)。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混
勻。
3. 溫育：用封板膜封板後置 37℃溫育30 分鍾。
4. 配液：將 30(48T 的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30(48T 的20倍)倍稀釋後備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒後棄去，如此
重複5 次，拍幹。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50 μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15分鍾.
10. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止
液後15分鍾以內(nei) 進行。
肺表麵活性注意事項：
1．試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，並經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控製在5 分鍾內(nei) ，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，做複孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值
大於(yu) 標準品孔*孔的 OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)後再測定，計
算時請zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5．封板膜隻限一次性使用，以避免交叉汙染。
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6．底物請避光保存。
7．嚴(yan) 格按照說明書(shu) 的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與(yu) 英文說明書(shu) 有異，以英文說明書(shu) 為(wei) 準。
計算：
以標準物的濃度為(wei) 橫坐標，OD值為(wei) 縱坐標，
在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的 OD
值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋
倍數；或用標準物的濃度與(yu) OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數，即為(wei) 樣品的實際濃度。
試劑盒性能：
1. 樣品線性回歸與(yu) 預期濃度相關(guan) 係數 R 值為(wei) 0.95 以上。
2. 批內(nei) 與(yu) 批見應分別小於(yu) 9%和11%
檢測範圍：
2 ng/L -40ng/L
保存條件及有效期：
1. 試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個(ge) 月
小鼠肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
豬肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
人肺表麵活性物質相關(guan) 蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒
