更新時間: | 2025-02-01 |
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廠商性質: | 生產廠家 |
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中文名稱:小鼠抗核抗體(ti) (ANA)ELISA試劑盒
英文簡稱:Mouse Anti-nuclear Antibody,ANA ELISAKit
規格:48T/96T,產(chan) 品由上海研謹生物提供,並提供免費代檢測服務!詳情請及時谘詢客服人員!
ELISA實驗條件:加樣,包被物質及其濃度
加樣:在ELISA中除包被外,一般需要進行4-5次加樣.在定性測定中有時不強調加樣量的準確性,例如規定為(wei) 加樣一滴,此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加液姿勢,使每滴液體(ti) 的體(ti) 積基本相同.在定量測定中加樣量力求準確.標本和結合物的稀釋液應按規定配製.加樣時應將液體(ti) 加在孔底,避免加在孔壁上部,並注意不可出現氣泡.
包被物質及其濃度:在ELISA中,將抗原或抗體(ti) 固定在載體(ti) 表麵,稱為(wei) 固想的包被或包埋,固想包被的質量直接關(guan) 係到酶免疫測定法的測定結果.理想的包被應該是:固相表麵應該吸附盡可能多的特異抗體(ti) (或純抗原物質);吸附應較牢固,能耐受數次洗滌;非特異性吸附作用要小.具體(ti) 操作中應考慮下述因素:包被物質及包被濃度,包被緩衝(chong) 液的pH及離子強度,包被溫度,時間及洗滌等.
抗原或抗體(ti) 吸附於(yu) 固相,吸附能力有差異.固相包被的機製有三種:*種是物理性吸附,即抗原或抗體(ti) 通過物理力被動地吸附於(yu) 疏水性固相載體(ti) 的表麵,物理性吸附的過程較簡單,不發生化學反應,不需特殊條件,適用於(yu) 多種類型和型式的載體(ti) ,如聚苯乙烯試管及酶標板凹孔,纖維素膜等,目前使用zui廣泛; 第二種是共價(jia) 交聯,先讓物理惰性物質(固相)接上化學性質活潑的基團,通過該基團再把抗原或抗體(ti) 與(yu) 固相載體(ti) 交聯,引入的活性基團常 為(wei) 戊二醛.濾紙亦可作為(wei) 固相,先用溴化氰激活紙質纖維素,再與(yu) 抗體(ti) 交聯,用化學交聯法製得的固相,其吸收容量大,批號之間的差異小,而且價(jia) 格低廉,用共價(jia) 法交聯可能是固相包被標準化的*途徑; 第三種是交聯於(yu) 蛋白質,應用極少.
固相抗體(ti) 與(yu) 固相表麵的吸附是通過物理作用.糖蛋白類物質如癌胚抗原,血型物質,脂蛋白,細菌脂多糖,糖脂及變性DNA,均可吸附於(yu) 聚苯乙烯塑料表麵,而天然DNA,中性多糖用於(yu) 包被塑料固相表麵的效果不佳或背景著色深.有人認為(wei) 聚苯乙烯吸附抗原好,聚乙烯吸附抗體(ti) 效果好.有一些預處理固相板的方法可以改善吸附,如廠家用射線照射,使用者用乙酸,鹽酸,戊二醛或多聚賴氨酸處理板.用戊二醛和鹽酸預處理板不僅(jin) 促進吸附,還能降低非特異性反應,用多聚賴氨酸可增強某些多糖抗原的吸附.更多介紹詳情請谘詢.
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