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產(chan) 品名稱：人細胞間粘附分子2（ICAM-2/CD102）ELISA試劑盒

英文名稱：Human ICAM-2 ELISAKit

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酶聯免疫吸附試驗

       ①直接法    該方法直接利用抗原 與(yu) 酶聯抗體(ti) 的結合，較簡單易行。A.假抗原。在聚苯乙烯酶標版的孔穴中加入待檢測的抗原（捕食者胃內(nei) 含物抽提液）0.2mL，在4℃冰箱中過一夜，使抗原黏附於(yu) 塑料孔壁上。B.洗滌兩(liang) 次，倒置於(yu) 幹毛巾上，使孔穴中的液體(ti) 盡量流出。c.加酶聯抗體(ti) 。 各孔穴中加入酶聯抗體(ti) 0.2mL，在mL37℃下孵育3h，使其充分結合。d. 加底物。 用PBS充分洗滌以除去未結合的酶聯抗體(ti) ，然後加入底物（鄰苯二胺）0.2 mL，於(yu) 37℃反應30min，用2mol/L硫酸0.05 mL終止反應。e. 用ELISA檢測儀(yi) 測定其吸光度值，分別設陽性、陰性和空白對照，以確定陽性反應臨(lin) 界值。

        ②雙抗體(ti) 夾心法   該方法與(yu) 直接法的不同在於(yu) 吸附抗體(ti) 。a. 包被抗體(ti) 。酶標板的孔穴中加入0.2 mL抗體(ti) （用PH=9.6/0.05mol/L碳酸鹽緩衝(chong) 液稀釋），置37℃水浴中孵育3h,移入4℃冰箱過一夜。將各孔中多餘(yu) 的抗體(ti) 傾(qing) 去，加入PBS洗滌，立即甩去，再將PBS加滿各板孔，置5min,甩去溶液，如此洗滌2次，倒置於(yu) 幹毛巾上，使孔穴中的液體(ti) 盡量流出。b. 加待檢抗原。沒孔中加入待檢捕食者胃內(nei) 含物抽提液0.2 mL.同時設陽性、陰性和空白（PBS）對照，37℃水溶中孵育3h，轉入冰箱中過一夜。如上法洗滌3次。C. 加入酶聯抗體(ti) 。每孔加入酶聯抗體(ti) 0.2 mL，37℃水浴孵育2h，如上法洗滌3次。d. 加底物。 每孔加入底物鄰苯二胺0.2 mL, 37℃水浴孵育1h,加入2mol/L硫酸0.05，以終止反應。e. 用 ELISA檢測儀(yi) 測定其吸光度值。

       ③間接法  與(yu) 前兩(liang) 種方法不同點在於(yu) 酶聯抗體(ti) 與(yu) 抗原的間接結合。a. 每孔加入待檢抗原0.2 mL ，4℃冰箱中過一夜，使抗原黏附於(yu) 塑料孔壁上。並依上法洗滌3次。b. 每孔加0.2 mL,用PBS稀釋的抗體(ti) ，37℃孵育2-3h。c.用PBS洗滌3次後，加入溶於(yu) PBS的酶聯抗體(ti) 0.2mL，37℃孵育2-3h。d. 加底物，方法同上。e. 用ELISA檢測.

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