• 整體課題全程協助外包服務
  • 細胞粘附
  • 油紅染色
  • 蛋白雙向
  • 切片包埋
  • PAS糖原染色
  • 酶活性檢測
  • PKC活性檢測
  • 半定量RT-PCR
  • 明膠酶譜MMP
  • 免疫沉澱CHIP
  • CBA流式多因子
  • 外包技術服務
  • 免疫共沉澱（Co-IP）

• 標本的保存及溫度
• 伊立替康的使用要注意哪些事項
• 五一假期安排
• 伊立替康對人體有什麽副作用
• 21年春節放假通知

SILAC代謝標記定量實驗服務

實驗技術簡介: SIL AC的基本原理是分別用天然同位素(輕型)或穩定同位素(重型)標記的必需氨基酸取代細胞培養(yang) 基中相應氨基酸，細胞經5-6個(ge) 倍增周期後，穩定同位素標記的氨基酸*摻入到細胞新合成的蛋白質中替代了原有氨基酸。不同標記細胞的裂解蛋白按細胞數或蛋白量等比例混合，經分離、純化後進行質譜鑒定，根據一級質譜圖中兩(liang) 個(ge) 同位 素型肽段的麵積比較進行相對定量。屬於(yu) 體(ti) 內(nei) 代謝標記法。

實驗操作流程:

1、蛋白提取和樣品製備

2、標記效率測試

3、樣品混台

4、SDS-PAGE分級

5、酶解

6、質譜鑒定

7、軟件分析

8、定性定量蛋白質組結果

9、生物信息學數據挖掘和統計分析

實驗注意事項:

客戶提供:

1、蛋白質提取物: 濃度>1μg/ul, 蛋白質總量>300μg.

2、細胞:通過細胞計數取不少於(yu) 2x106個(ge) 細胞於(yu) EP管，加入0 5ml生理鹽水或蛋白保護劑，混勻後保存於(yu) 冰箱(-80°C， 避免反複凍融)。

交付標準:

1、蛋白質鑒定和SIL AC定量分析結果;

2、客戶指ding蛋白質對應的質譜峰圖;

3、SIL AC實驗完整的實驗步驟、使用儀(yi) 器、軟件檢索參數等。

其他:

1、SILAC是體(ti) 內(nei) 標記技術，穩定同位素標記的氨基酸與(yu) 天然氨基酸化學性質基本相同，所標記的細胞和未標記細胞在生物學行為(wei) 上幾乎沒有差異，標記效率可高達100%。

2、采用質譜定量,定量結果準確且批次變異小、重複性好。

3、體(ti) 內(nei) 代謝標記與(yu) SDS- PAGE或色譜分離技術相結合，兼容疏水性蛋白和偏堿性蛋白，不受蛋白性質限製。

4、多個(ge) 樣品混合後同時進行分離、酶切和鑒定,後續實驗對樣品的影響一致， 減少了實驗操作和儀(yi) 器設備產(chan) 生的影響。

5、由於(yu) 該技術屬於(yu) 體(ti) 內(nei) 標記，標記效果穩定，其標記效率不受裂解液的影響，不僅(jin) 適合於(yu) 進行全細胞蛋白的分析，還適合於(yu) 膜蛋白的鑒定和定量。

6、與(yu) 化學標記相比，SIL AC方法蛋白需要量明顯減少，通常每個(ge) 樣品隻需要幾十微克的蛋白量。

7、活體(ti) 標記，更接近樣品真實狀態。

8、隻適用於(yu) 活體(ti) 培養(yang) 的細胞，對於(yu) 生物醫學研究中常用的組織樣品，體(ti) 液樣品等無法分析,對於(yu) 動物模型的標記成本太大，無法實現。與(yu) 體(ti) 外標記技術相比，SIL AC屬於(yu) 體(ti) 內(nei) 標記，具有以下技術優(you) 勢

1、高通量，可同時鑒定並定量數百至數千種蛋白質;

2、定量精*&確，降低由於(yu) 樣品製備不同而造成的實驗差異;

3、線性定量範圍廣;

4、靈敏度更高，蛋白質需要量明顯減少;

5、標記采用的是體(ti) 內(nei) 標記技術，更接近樣品真實狀態。

SILAC技術服務內(nei) 容

1、細胞同位素標記;

3、SDS-PAGE分離;

4、胰酶酶切後液相分離和質譜分析;

5、數據庫檢索及蛋白質定量分析;

6、差異蛋白的生物信息學分析;

7、實驗報告提交。

實驗服務報告內(nei) 容

1、蛋白定鑒定和SIL AC定量分析結果;

2、顧客指ding蛋白質對應的質譜峰圖;

3、SIL AC實驗完整的實驗步驟、使用儀(yi) 器、軟件檢索參數等。

技術服務優(you) 勢

1、靈敏度高，檢測限低，可檢測出低豐(feng) 度蛋白;

2、分離能力強，分析範圍廣，iITRAQ可以對任何類型的蛋白質進行分離鑒定，包括高分子量蛋白質、酸性蛋白和堿性蛋白，膜蛋白和不溶性蛋白;

3、高通量:同時對8個(ge) 樣本進行分析，提高了實驗通量，可同時對多個(ge) 時間點或不同處理的蛋白質進行分析;

4、結果可靠:定性與(yu) 定量分析結果更加可靠;

5、自動化程度高:液相與(yu) 質譜連用，自動化操作，分析速度快，分離效果好。

實驗代做服務：