| 更新時間： | 2025-02-18 |
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| 廠商性質： | 生產廠家 |
豬瘟病毒阻斷ELISA抗體(ti) 檢測試劑盒用於(yu) 檢測血清中豬瘟病毒抗體(ti) ，適用於(yu) 對豬場豬瘟疫苗免疫狀況的評價(jia) 以及感染豬的血清學診斷。
EA01C00 2018-01版
豬瘟病毒阻斷ELISA抗體(ti) 檢測試劑盒說明書(shu)
【產(chan) 品名稱】
通用名稱：豬瘟病毒阻斷ELISA抗體(ti) 檢測試劑盒
英文名稱：Blocking ELISA Kit For Classical Swine Fever Virus Antibody test
【規格】
96T×2/盒
【用途】
用於(yu) 檢測血清中豬瘟病毒抗體(ti) ，適用於(yu) 對豬場豬瘟疫苗免疫狀況的評價(jia) 以及感染豬的血清學診斷。
【檢驗原理】
本試劑盒是用來檢測豬血清中豬瘟病毒抗體(ti) 的試劑盒。該試劑盒是用豬瘟病毒抗原包被的微量反應板，利用阻斷ELISA原理來檢測豬血清中豬瘟病毒抗體(ti) 。用酶標儀(yi) 在雙波長(450nm，630nm)測定該反應體(ti) 係的吸光度。當被測樣品中含有豬瘟病毒抗體(ti) (陽性結果)時，顯色就會(hui) 變淺，當被測樣品中不含有抗豬瘟病毒抗體(ti) (陰性結果)時，顏色就會(hui) 變深。樣本的阻斷率可以通過與(yu) 陰性對照吸光度的比值來確定。
【主要組成成份】
1 | 抗原包被板 | 96T×2 | |
2 | 酶標記物 | 22ml | 黃色帽 |
3 | 樣本稀釋液 | 50ml | 透明帽 |
4 | 陰性對照血清 | 1ml | 綠色帽 |
5 | 陽性對照血清 | 1ml | 紅色帽 |
6 | 顯色劑 | 12*2ml | 橙色帽 |
7 | 終止液 | 12ml | 藍色帽 |
8 | 20X濃縮洗滌液 | 50ml | 白色帽 |
9 | 蓋板膜 | 2張 |
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10 | 說明書(shu) | 1份 |
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【自備器材】
1．酶標儀(yi) ：雙波長450/630nm濾光片
2．精確的微量移液器（單道1-100ul、0.5-10ul、多道30-300ul）
3．水浴箱或恒溫箱
4．微量振蕩器
5．洗液吸移裝置
6．一次性槍頭（10ul，200ul）
7．去離子水
【樣本要求】
本試劑檢測的樣本為(wei) 豬血清或血漿，樣本應無菌采集，2℃～8℃貯存應不超過一周，長期應在-20℃以下保存。
【實驗準備】
1．試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實驗前，先取出置室溫30min，可以獲得jia結果。
2．樣本稀釋：用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本和陰性陽性對照血清作2倍稀釋（即：60μl血清加60μl樣本稀釋液），混合均勻。
3．配製洗滌液：將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋20倍（即1ml濃縮洗滌液加19ml水），即可使用。注意：使用前要使結晶*溶解。
【檢驗方法】
1．加樣：根據樣本數量，取所需板條，檢測時，設陰、陽性對照各2孔，分別加入稀釋好的陰性、陽性對照血清100μl於(yu) 相應孔中。其餘(yu) 為(wei) 樣本孔，每孔加100μl用樣本稀釋液稀釋好的樣本（可做單孔也可雙孔檢驗）。
2．溫育：加樣後，蓋上蓋板膜，置37℃溫育120分鍾。
3．洗板：甩去孔內(nei) 液體(ti) ，用洗滌液注滿反應板孔，靜置10秒，直接甩出，洗滌3次，後一次洗滌後在吸水紙上拍幹板內(nei) 液體(ti) 。
4．加酶：每孔加酶標記物100μl。
5. 溫育：加好酶標記物的反應板蓋好蓋板膜，置37℃溫育30分鍾。
6．洗板：同步驟3。
7．顯色：每孔加顯色劑100μl，振蕩混勻，37℃避光反應10分鍾。
8．終止：每孔加終止液50μl，振蕩10秒，充分混勻，終止後即讀數。
9．讀數：以450nm/ 630nm雙波長檢測，讀取各孔吸光度值（OD值）。
【結果判定】
在酶標儀(yi) 上測各孔OD值，試驗成立條件是陰性對照OD值大於(yu) 1.0，陽性對照的阻斷率均大於(yu) 50％，若試驗不成立，有可能是操作失誤造成，應重讀說明書(shu) ，再操作一次。
S=樣品孔OD值，N=陰性對照孔平均OD值
阻斷率=(1–S/N)×100%
若被檢樣品的阻斷率小於(yu) 或等於(yu) 30%，該樣品判為(wei) CSFV陰性。
若被檢樣品的阻斷率大於(yu) 或等於(yu) 40%，該樣品判為(wei) CSFV陽性。
若被檢樣品的阻斷率在30%~40%之間，該樣品判為(wei) 可疑。
【注意事項】
1．本試劑盒僅(jin) 供研究使用。
2．不要使用過期的試劑盒組分，不要把不同批次的組分混合使用。
3．使用試劑盒之前，一定要仔細閱讀說明書(shu) 。
4 使用前，濃縮的洗滌液應恢複至室溫（20～25℃），並搖動使沉澱溶解（hao在37℃水浴鍋中加熱5～10分鍾），然後用去離子水作20倍稀釋（例如：50ml的濃縮洗滌液加上950ml蒸餾水），混勻，稀釋好的洗滌液在2～8℃可以存放7-10日。
5．本試劑盒應按含有傳(chuan) 染性材料對待，試驗廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鍾，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鍾後廢棄。
6．微孔板從(cong) 冷藏環境中取出時應在室溫中平衡。未用完的液體(ti) 試劑應蓋好瓶蓋，與(yu) 其它配套組份放入試劑盒中於(yu) 2℃-8℃避光保存。
7．應用微量移液器加入樣本及試劑，並經常校對其準確性。
8．加洗滌液時應做到滿而不溢，防止孔口有遊離酶不能洗淨或各孔間的交叉汙染。
9．終止液有腐蝕性，若濺到皮膚或衣物上應立即用大量清水衝(chong) 洗幹淨。
【儲(chu) 存條件及有效期】
於(yu) 2℃～8℃避光保存，防止冷凍，有效期12個(ge) 月。
【生產(chan) 日期及批號】
詳見包裝袋和外包裝盒。
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