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流式細胞術檢測技術服務
流式細胞術檢測技術服務
更新時間:2025-02-17
訪問量: 5111
廠商性質: 生產廠家

流式細胞術檢測技術服務:
1.客戶提供血液樣本。
2.公司提供圖片和分離後的細胞。
3.實驗周期為(wei) 2周左右,具體(ti) 根據實驗內(nei) 容而定。

流式細胞術檢測技術服務產品概述:

流式細胞術檢測技術服務

 流式細胞術檢測技術服務
1、檢測項目:
   (1)細胞周期細胞   (2)細胞凋亡    (3)免疫細胞分型     (4)表麵抗原鑒定          (5)細胞內(nei) 鈣離子檢測   (6)線粒體(ti) 功能      (7)細胞分選
2、樣本及來源:
    1) 單個(ge) 細胞:1~2×106 個(ge) 細胞左右;來源於(yu) 人、小鼠、大鼠或其它。
    2) 外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;來源於(yu) 人、小鼠、大鼠或其它。
 
說明:
1、  實驗所用的流式細胞儀(yi) 為(wei) COULTER EPICS XL。
2、  送檢樣本量:
        1)、單個(ge) 細胞:1~2×106 個(ge) 細胞左右;來源於(yu) 人、小鼠、大鼠或其它。
        2)、外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;來源於(yu) 人、小鼠、大鼠或其它。
3、  用戶需要進行流式細胞儀(yi) 檢測時須提前預約,同時說明實驗目的、方法等。一次送檢標本數不少於(yu) 10個(ge) 。如果一次送檢標本總數不足10個(ge) ,每個(ge) 測試費用為(wei) 標準收費×2。
4、  我公司在正式接受實驗委托一周內(nei) 交付實驗結果。所提供實驗結果忠實於(yu) 樣本的實際情況。
5、  用戶須一次性全額預付實驗費。
6、  部分常用熒光探針,如PI等,我公司可免費提供,;特殊標記物,如CD抗體(ti) 等,用戶須另行購買(mai) ,也可委托我公司代購;用戶所提供抗體(ti) 應可與(yu) 樣本發生特異性識別反應。
7、  由用戶提供的樣品或試劑所致的實驗問題由用戶負責。
8、  請在表中說明檢測具體(ti) 要求(可另附頁),由於(yu) 填寫(xie) 資料不詳所致任何問題由用戶負責。
9、  請在送樣的同時提供樣本來源及處理方法等信息,樣品檢測後原則上本公司不負責保存。
客戶提供:
(1)標本:組織、細胞、全血(抗凝)
(2)抗體(ti) (熒光素標記)
        PEqiang,適用於(yu) 弱表達抗原
        FITC*便yi,適用於(yu) 強表達抗原,適用範圍廣
        biotin-avidin不適合 弱抗原的檢測
(3)其他試劑(如Fluo-3)
(4)染色試劑盒
 附:流式細胞術檢測樣品推薦製備方法:
 
A. 直接標記抗體(ti) (FITC標記抗體(ti) ):
    (1) 、收集1×106個(ge) 細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
    (2) 、用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鍾,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
    (3) 、用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(ti) (5×105個(ge) 細胞/20ul抗體(ti) )的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
    (4) 、用流式細胞儀(yi) 檢測熒光值,每管計數10 000個(ge) 細胞。
 
B. 未標記抗體(ti) 間接免疫熒光標記法:
    (1)、收集2×106個(ge) 細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
    (2)、用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
    (3)、用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
    (4)、加入飽和劑量未標記抗體(ti) ,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重複一次。
    (5)、加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min後,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩(liang) 次。
    (6)、加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
    (7)、流式細胞儀(yi) 檢測熒光值,每管計數10 000個(ge) 細胞。
 
C.細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體(ti) 分析樣品(PI染色)的製備:
    (1)、待測樣本製成單細胞懸液,然後2000轉/分離心5分鍾,棄上清。
    (2)、用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小時。
    (3)、調整細胞濃度為(wei) 106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸於(yu) 1毫升PI染液中,37℃孵育30分鍾即可進行流式分析。
    (4)、PI染液終濃度為(wei) 50微克/毫升,RNase A終濃度為(wei) 20微克/毫升。

 

實驗代做服務:

 

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