ELISAS實驗血清的製備

（2）抗血清的製備

 ① 所需的抗原量   一般1-10mg/mL。

②免疫途徑   抗原的注射方法有皮下注射、肌肉注射、腹膜內(nei) 注射、靜脈注射和淋巴結注射等。其中以靜脈注射zui為(wei) 簡單方便，不需要佐劑乳化，產(chan) 生抗體(ti) 的高峰值出現較早，一般在一周左右，注射後一周即可采血測試效價(jia) 。免疫過程中應注意：a.佐劑隻能現配現用：b.采血時間不宜拖得太長。因為(wei) 免疫時間越長，產(chan) 生交叉反應的抗體(ti) 也越多。

③抗血清的分離   當得到滿意的效價(jia) 時，即可進行取血。將收集到的血液成斜麵放置在37℃、溫箱中2h。然後置於(yu) 4℃冰箱過一夜。次日用滴管吸取抗血清，用離心法（2000-3000r/min,20min）去掉沉澱。然後測定效價(jia) 、鑒定純度。純度用紫外分光光度計或Folin氏比色法進行測定。抗血清保存於(yu) -25℃低溫處。

 ④抗血清的效價(jia) 測定    測定的方法一般有兩(liang) 種，即試管沉澱法和免疫雙擴散法。對於(yu) 免疫酶技術使用的抗血清，必須具有一定的效價(jia) ，試管沉澱法應不低於(yu) 1:2，免疫雙擴散法不低於(yu) 1:2，且要求單價(jia) 抗血清。

 （3）捕食者的收集和準備     主要方法有3個(ge) ：①將胃內(nei) 含物擠在質量好的濾紙上，但蛋白質易與(yu) 纖維素結合，若保存過久則難以洗脫：②將待檢查的捕食封閉在明膠膠囊內(nei) ，並加幹燥劑，以使蟲體(ti) 與(yu) 膠囊分離：③盡可能快地將采集到的捕食者儲(chu) 存於(yu) 低溫下（如-40℃）。前兩(liang) 種方法適於(yu) 郵寄和長途運輸，後一種方法能保存較長的時間。所有的方法都需保持幹燥。對較大的捕食者，可將消化道分離，像蟻、蝸牛以及蜘蛛等小型動物則整個(ge) 蟲體(ti) 。（4）酶聯抗體(ti) 的製備  按戊二醛簡易法進行。