ELISAS實驗抗原的攝取

（1） 抗原的攝取  任何血清學試驗都依賴於(yu) 具有價(jia) 、特異性強的抗血清的產(chan) 生，而抗血清的製備離不開抗原的收集、保存和提取。采回的害蟲饑餓24h後，將等體(ti) 積的磷酸緩衝(chong) 液（PBS）滴入備用的害蟲中，研磨後加入過量的PBS（PH=7.4）,在4℃下攪拌24h,然後以4000-5000r/min的速度離心20h,分離上清液。沉渣用上法重複抽提一次。

將兩(liang) 次所得的上清液混合後，置於(yu) 4℃下更換多次冷鹽水透析24h或48h。透析液用冰凍幹燥法或反透析法進行濃縮。濃縮液用紫外分光光度計測定蛋白質含量，得到適當濃度的蛋白質溶液即位抗原。

  抽提過程中應注意：①所有的處理都需在低溫（4℃）下進行，以防蛋白質變性：②若抗原溶液需保存較長的時間，則需加防腐劑（如NaN3）或在凍幹狀態下保存：③為(wei) 製備特異性強的抗血清，抗原可用標準的生化技術進行純化：④如一次不能收集足夠的抗原，可將每次的蟲體(ti) 保存在-20℃或將抗原凍幹直到積累足夠的量。