培養(yang) 細胞的起源
大多數人是在標準條件下用有限或連續細胞係開展工作的.所以,考慮培養(yang) 物中的細胞成分非常重要.如細胞在誘導條件下表現分化特征,要麽(me) 意味著培養(yang) 的細胞是成熟的,保持其持續合成特殊蛋白質的能力就夠了;要麽(me) 意味著培養(yang) 細胞由前體(ti) 細胞或幹細胞組成,這些細胞有增殖能力,美工維持未分化狀態,當有了合適的誘導條件,其中的一些或全部細胞會(hui) 成熟並分化.有指導意義(yi) 的考慮是,把培養(yang) 物看成是由多能幹細胞,未分化的定向前體(ti) 細胞和成熟細胞組成的平衡狀態,並且,這種平衡可隨環境條件變化而改變.在細胞密度較低的情況下,連續傳(chuan) 代可促進細胞增殖和限製細胞分化,而高細胞密度,低血清和合適的激素條件可以促進細胞分化,抵製細胞增殖.
培養(yang) 細胞的來源可決(jue) 定以後形成的培養(yang) 物的細胞組成.因此,從(cong) 胚胎獲得的細胞係比來源於(yu) 成熟組織的細胞係包含有相對多的幹細胞和前體(ti) 細胞,有更強的自我更新的能力.另外,從(cong) 體(ti) 內(nei) 不斷更新的組織(如表皮,腸上皮,造血細胞)獲得的細胞培養(yang) 物仍可能含有幹細胞,在適當的條件下,它們(men) 將有較長的生命期限.但那些來源於(yu) 在應激條件下才更新的組織,如成纖維細胞,肌肉,神經膠質的培養(yang) 物,可能隻含有一些生命期限明確,能進行定向分化的前體(ti) 細胞.
因此,鑒定培養(yang) 的細胞時,不能隻局限於(yu) 體(ti) 內(nei) 的細胞譜係(造血細胞,肝細胞,神經膠質細胞等),還得考慮譜係所處的生長階段(幹細胞,定向前體(ti) 細胞或成熟的分化細胞).雖然,沿著分化的進展途徑被認為(wei) 是不可逆的,但是定向(commitment)的概念目前正被人們(men) 質疑[Kondo and Raff,2004;Le Douarin et al.,2004].某些前體(ti) 細胞可以轉變成回複成幹細胞狀態並且沿著相同的或不同的譜係再分化.
在培養(yang) 過程中,從(cong) 腫瘤得到的細胞不遵循上述規則,例如,大鼠肝癌細胞在體(ti) 外增殖,便仍能表現一些分化特征,它們(men) 越接近正常細胞的表型,細胞增殖就受到越強的抑製.雖然細胞在細胞係中的地位或許與(yu) 增殖的關(guan) 係並不密切,但並不是沒有關(guan) 聯(例如,在高密度,低增殖速率時,B1,黑色素瘤細胞產(chan) 生的黑色素較多).到目前為(wei) 止,人們(men) 還不能肯定細胞譜係之間能否發生轉變.