可見分光光度法

植物總酚（TP）含量檢測試劑盒說明書(shu)  貨號：YJS2309

規格：50T/24S

產(chan) 品內(nei) 容：

提取液：60%乙醇， 自備。

試劑一：液體(ti)  20mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體(ti)  25mL×1 瓶，4℃保存。

標準品：液體(ti)  1mL×1 支，4℃保存。1mg/mL 單寧酸標準溶液。

產(chan) 品說明：

植物酚類物質具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營養(yang) 價(jia) 值和醫療保健作用而 廣泛應用於(yu) 化妝品、食品、醫藥等領域。

在堿性條件下，酚類物質將鎢鉬酸還原，產(chan) 生藍色化合物，在 760nm 處有特征吸收峰，測 760nm 處的

吸光值，即可得樣品總酚含量。

自備實驗用品及儀(yi) 器：

天平、烘箱、粉碎儀(yi) 、篩子、超聲破碎儀(yi) 、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比 色皿、蒸餾水。

操作步驟：

一、總酚提取

將樣本烘幹至恒重，粉碎，過 40 目篩之後，稱取約 0. 1g ，加入 2.5mL 提取液，用超聲提取法進 行提取，超聲功率 300W ，破碎 5s ，間歇 8s ，60℃ , 提取 30min 。12000rpm ，25℃ , 離心 10min ， 取上清，用提取液定容至 2.5mL ，待測。

二、標準品製備：

將 1mg/mL 單寧酸標準溶液二倍稀釋至 0.3125、0.1562、0.0781、0.0391、0.0195、0.0098、0.0049、 0.0024 、0.0012 、0.0006mg/mL ，待測。

三、測定操作表

1 、分光光度計預熱 30min 以上，調節波長至 760nm ，蒸餾水調零。

2 、操作表

空白管隻測一次。

四、總酚含量計算

1 、標準曲線繪製：

以不同濃度的單寧酸為(wei)  x 軸，ΔA（A 標準-A 空白）為(wei)  y  軸繪製標準曲線 y= kx+b。

2 、植物總酚含量計算：

將ΔA=A 測定-A 對照帶入標準曲線，求 x(mg/mL)。

（1） 按樣本鮮重計算

總酚含量（mg/g  鮮重）= x×V 提取÷W= 2.5x÷W （2） 按樣本

蛋白濃度計算

總酚含量（mg/mg prot）= x×V 提取÷（V 提取×Cpr）= x ÷Cpr

V 提取：提取液體(ti) 積，2.5 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣品質量，g。

注意事項：

（1）OD 值大於(yu)  1.0 ，樣品適當稀釋再測定，注意計算公式裏乘以稀釋倍數。

（2）試劑一對皮膚有一定的刺激性，請操作時做好防護措施。

本產(chan) 品僅(jin) 供科學研究使用！請勿用於(yu) 臨(lin) 床、診斷、食品、化妝品檢測等用途！

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