土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）試劑盒說明書(shu)

微量法

產(chan) 品內(nei) 容：

試劑一：甲苯1mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：液體(ti) 7.5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨(lin) 用前每瓶加入22mL 蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存；

試劑四：液體(ti) 22mL×1 瓶，4℃保存。

產(chan) 品說明：

S-SC 能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體(ti) 吸收，其酶促作用產(chan) 物與(yu) 土壤中有機質、氮、

磷含量，微生物數量及土壤呼吸強度密切關(guan) ，是評價(jia) 土壤肥力的重要指標。

S-SC 催化蔗糖降解產(chan) 生還原糖，進一步與(yu) 3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在510nm 有特征光吸收，在一定範圍內(nei) 510nm 光吸收增加速率與(yu) S-SC 活性成正比。

自備用品：

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、台式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、

研缽、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：

一、加樣表：

充分混勻，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻，蒸餾水稀釋10倍（可以吸取100μL，加入900μL 蒸餾水稀釋；若吸光度大於(yu) 4，可以加大稀釋倍數），取200uL 至微量石英比色皿或96 孔板中510nm 處讀吸光值A。計算ΔA=A測定管-A對照管。每個(ge) 測定管需設一個(ge) 對照管。

二、S-SC 活性計算：

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 4.9x -0.062；x 為(wei) 標準品濃度（mg/mL），y 為(wei) 吸光值。

單位的定義(yi) ：每天每g 土樣中產(chan) 生1mg 還原糖定義(yi) 為(wei) 一個(ge) S-SC 活力單位。

S-SC 活力(U /g 土樣)=(A+0.062) ÷4.9×10×V 反總÷W÷T =20.4×(A+0.062)

10：稀釋倍數；T：反應時間，1d； V 反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積：0.3mL；W：樣本質量，0.03g。

b. 用96 孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 2.45x -0.062；x 為(wei) 標準品濃度（mg/mL），y 為(wei) 吸光值。

單位的定義(yi) ：每天每g 土樣中產(chan) 生1mg 還原糖定義(yi) 為(wei) 一個(ge) S-SC 活力單位。

S-SC 活力(U /g 土樣)=(A+0.062) ÷2.45×10×V 反總÷W÷T =40.8×(A+0.062)

10：稀釋倍數；T：反應時間，1d； V 反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積：0.3mL；W：樣品質量，0.03g。