血鈣濃度檢測試劑盒說明書(shu)

微量法

注意：正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi) ：

血鈣幾乎全部存在於(yu) 血漿中，所以血鈣主要指血漿鈣。血漿鈣有離子鈣和結合鈣兩(liang) 種形式，

其中隻有離子鈣直接起生理作用，它與(yu) 結合鈣處於(yu) 動態平衡，並受血液 pH 的影響。血鈣水

平與(yu) 多種重要的生理功能相關(guan) ，過高或過低都會(hui) 影響正常生理功能。本試劑盒用於(yu) 檢測血液

中遊離鈣濃度。

測定原理：

在強堿溶液中遊離鈣與(yu) GBHA 反應生成紅色鈣-GBHA 複合物，在 520nm 有吸收峰；通過測定 520nm 吸光度，計算遊離鈣濃度。

自備儀(yi) 器和用品：

可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、石英比色皿/96 孔板、無水甲醇、丙酮和蒸餾水。

試劑組成和配置：

試劑一：液體(ti) ×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體(ti) ×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體(ti) ×1 瓶（空瓶，試劑自備）。取10 mL試劑瓶。依次加入9 mL無水甲醇和1mL丙酮，蓋緊混勻即可。

標準液：液體(ti) ×1 瓶，3μmol/mL，4℃保存。

血鈣濃度測定操作：

1. 分光光度計預熱30min以上，調節波長到520nm，蒸餾水調零。

2. 空白管：取石英比色皿/96孔板，依次加入蒸餾水12μL，試劑一50μL，混勻；再加入試劑二50μL，混勻；zui後加入試劑三100μL，混勻；靜置5min後於(yu) 520nm測定吸光度A空白管。做一個(ge) 空白管即可。

3. 標準管：取石英比色皿/96孔板，依次加入標準液12μL，試劑一50μL，混勻；再加入試劑二50μL，混勻；zui後加入試劑三100μL，混勻；靜置5min後於(yu) 520nm測定吸光度A標準管。做一個(ge) 標準管即可。

4. 測定管：取石英比色皿/96孔板，依次加入血液樣品12μL，試劑一50μL，混勻；再加入試劑二50μL，混勻；zui後加入試劑三100μL，混勻；靜置5min後於(yu) 520nm測定吸光度A測定管。記為(wei) A 測定管。

注意：空白管和標準管隻需測定一次，做三次重複。

血鈣濃度計算公式：

血鈣含量(μmol/mL)= [C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×V 樣品總=3×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)

C 標準液：3μmol/mL； V 樣總：樣品總體(ti) 積，1 dL=100 mL。

注意事項：

1. 宜早晨空腹采血，並且采血後應該盡快完成測定。

2. 靜置 5 分鍾後立即測定。

3. 加試劑三後，應該在 30 min 內(nei) 完成該管的測定。

4. zui低檢出限為(wei) 0.1μmol/mL。