pUC-T TA載體(ti) 是一種克隆PCR產(chan) 物的載體(ti) ,它是由pUC18載體(ti) 在EcoR V 酶切位點處切開,在兩(liang) 側(ce) 的3′端添加T而成。由於(yu) 大部分耐熱聚合酶反應時都會(hui) 在 PCR 產(chan) 物的3′端添加一個(ge) A,它可以與(yu) pUC-T 3′端的T互補連接,因此可大大提高PCR產(chan) 物的 連接和克隆效率。 試劑盒中配備率的T4 DNA Ligase和為(wei) 快速DNA連接優(you) 化的2×Quick Ligation Reaction Buffer。連接效率相當於(yu) 用T4 DNA Ligase 進行常規連接1小時。帶有插入片 段的重組子可根據α互補原理,進行藍白斑篩選,判斷載體(ti) 中有無外源基因的插入。克 隆後可以用BcaBEST Sequencing Primers和 M13通用引物對PCR產(chan) 物進行測序。
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