猴腫瘤浸潤組織白細胞分離液說明書(shu)

（細胞培養(yang) 及分子生物學）

【產(chan) 品規格】

200ml/Kit

貨號：WBC1078HZ

【產(chan) 品組成】

為(wei) 方便廣大用戶使用，試劑內(nei) 容如下：

全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。

• 首先製備組織單細胞懸液，製備方法詳見“組織單細胞懸液製備技術”。

• 取一支 15ml 離心管，加入與製備的組織單細胞懸液等量的分離液（注：分離液zui少不得少於 5ml）。

• 用吸管小心吸取製備的組織單細胞懸液加於分離液液麵上，400-500g，離心 20-30min。（注：根據組織單細胞懸液樣本量確定離心條件，組織單細胞懸液量越大，離心力越大，離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到*分離效果）。

• 離心後用吸管小心吸取所有環狀乳白色細胞層（一層或兩層），加入 10 ml 清洗液（產品編號：2010X1118），混勻細胞。250g，離心 10min。重複洗滌 2-3 次，即得所需白細胞。

• 如有紅細胞殘留請使用紅細胞裂解液（產品編號：NH4CL2009）裂解紅細胞，具體操作方法詳見“紅細胞裂解液使用說明”。

【注意事項】

• 全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得*的實驗結果，在取樣 2h 內進行實驗，樣品存放時間越長，細胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 後分離效果更差甚至不能達到分離目的。

• 本實驗不要使用高聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料製品，應使用無靜電、低靜電離心管及未經堿處理過後的玻璃製品，因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表麵會變成毛麵，影響細胞分離效果。

• 分離液用量大於製備的組織單細胞懸液樣本時，分離效果更佳。

• 如實驗後細胞得率或活性過低，請上海研謹技術以尋求幫助。

【儲(chu) 存條件及有效期】

18-25℃保存，有效期 2 年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟

封後置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現白色結晶，影響分離效果。

【參考值（參考範圍）】

本實驗白細胞提取率及純度大於(yu) 80%。

下表為(wei) 成年人外周血中各種細胞的數量及比例，用戶可適當進行參考。

【相關(guan) 實驗技術方案】

1. 組織單細胞懸液製備技術

• 所獲得白細胞的培養技術。

• 所獲得白細胞的核酸提取技術。

• 所獲得白細胞的鑒定方法A.流式細胞技術
• B.bv官网中国官方网站技術
• C.原位雜交技術

D.PCR 技術

注：上述技術方案詳情請登陸本公司搜索“細胞分離、

純化、擴增、鑒定及生物治療技術手冊(ce) ”，並在說明書(shu) 項目欄下下載使用。

【可能存在的問題及解決(jue) 方法】

1. 由於(yu) 血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決(jue) 方案如下表所示：

• 本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度、大氣壓等密切相關。不同地區客戶可根據當地情況對離心條件進行適當調整。建議對離心條件進行調整時，恒定離心時間，對離心轉速進行調整。

• 本分離液依照標準，全部使用藥用級原料，性能指標與國產同類產品略有不同，可

能出現紅細胞沉降不*的情況，可以適當加大離心轉速。

注：在對離心條件進行調整時，離心轉速的加減以 50-100g 為(wei) 基數，直至達到*分離效果，

離心力zui小不得小於(yu) 400g，zui大不得大於(yu) 1200g。離心時間以 20-30min 為(wei) 準。