培養(yang) 基配方

常用培養(yang) 基

（1）血液瓊脂（血平板）：

   【配方一】    

   成分：普通營養(yang) 瓊脂90rot；脫纖維羊血(或兔血)10ml。

   製法：將已滅菌的普通營養(yang) 瓊脂(pH7.6>加熱融化；冷卻至50℃左右，以無菌手續加入10ml脫纖維羊血（臨(lin) 用前置37℃水浴箱預溫），輕輕搖勻（勿使有氣泡），傾(qing) 注於(yu) 滅菌平皿內(nei) ，每一平皿(直徑9 cm)13～15ml或分裝試管，製成斜麵；待凝固後，抽樣置37℃培養(yang) 18～24h，觀察有無細菌生長；如無菌生長，置4℃備用。

   【配方二】

   成分：肉膏湯(pH7.8)800ml；硫酸鎂(493g/L)8 ml；脫纖維羊血80ml；瓊脂21～23g；5.0g/L對氨基ben甲酸8ml。

   製法：將肉膏湯置三角燒瓶內(nei) ，加入硫酸鎂、對氨基ben甲酸及瓊脂，混合並使液體(ti) 浸濕瓊脂，121.3℃高壓滅菌30分鍾，取出冷至50℃左右，以無菌手續加入37℃水浴預溫的無菌脫纖維羊血或兔血，輕輕搖勻，傾(qing) 注平板，凝固後，抽樣置37℃培養(yang) 18～24h，如無菌生長冷藏備用。

（2）巧克力色血瓊脂（巧克力平板）：

   成分：與(yu) 血瓊脂配方相同。

   製法：與(yu) 血瓊脂相同，但於(yu) 培養(yang) 基中加入血液混勻後，須再置85℃水浴10～15分鍾，使血液的顏色由鮮紅轉變為(wei) 巧克力色；取出並冷至50℃左右，傾(qing) 注平板，經無菌試驗後存4℃備用。

（3）麥康凱瓊脂：分離腸道杆菌用。

   成分：蛋白腖20g；乳糖10g；10g/L的中性紅水溶液5ml；氯化鈉5g；瓊脂20一25g；膽鹽5g（或牛膽酸鈉4g與(yu) 去氧膽酸鈉1g），加蒸餾水1000ml。

   製法：將蛋白腖、氯化鈉、膽鹽及乳糖加於(yu) 500ml蒸餾水中加熱溶解；將瓊脂加於(yu) 餘(yu) 下的500ml蒸餾水中加熱溶解；將上述兩(liang) 液趁熱混合，調整pH至7.4，以絨布過濾，按每瓶100ml分裝，115.6℃高壓滅菌20分鍾，待冷卻至50～60℃時，每100ml培養(yang) 基中加入經煮沸滅菌的10g/L中性紅溶液0.5ml，混合後傾(qing) 注平板。

  注意事項：膽鹽能抑製部分非病原菌及革蘭(lan) 氏陽性細菌的生長，但能促進某些革蘭(lan) 氏陰性病原菌的生長；因含有乳糖及中性紅指示劑，故分解乳糖的細菌（如大腸杆菌），菌落呈紅色；不分解乳糖的細菌，菌落不呈紅色。

（4）伊紅美藍瓊脂(EMB)：分離腸道杆菌用。

   成分：肉膏湯瓊脂(pH7.4)100ml；20g/L的伊紅水溶液(滅菌)2ml；乳糖1g；6g/L的美藍水溶液(滅菌)1mI。

   製法：加熱溶化已滅菌的肉膏湯瓊脂，加入乳糖1g；待冷至50℃左右，加入伊紅及美藍溶液，混勻傾(qing) 注平板，凝固後備用。

（5）羅氏培養(yang) 基：分離結核杆菌用。

   成分：磷酸二氫鉀(無水)0.96g；天門冬酰胺(天門冬素)0.72g；枸櫞酸鎂0.12g；硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.048g；純甘油(中性)2.4ml；蒸餾水120ml；馬鈴薯粉6.0g，新鮮雞蛋6～8個(ge) ；10g/L的孔雀綠溶液8ml。

   製法：將磷酸二氫鉀至純甘油的各成份混合，置沸水中加熱溶解，加入馬鈴薯粉，邊加邊攪拌，注意勿結成塊，並繼續在沸水浴中加熱半小時，時加攪拌，待冷至65℃時加入全蛋液200ral及10g/L孔雀綠溶液8ml，充分混勻，分裝於(yu) 無菌試管，每管約5～6ml，塞上橡皮塞；置血清凝固器內(nei) 經90℃1h，製成斜麵。

（6）沙保弱氏培養(yang) 基：培養(yang) 真菌用。

   成分：蛋白腖10g；葡萄糖40g；瓊脂20g；蒸餾水1000ml。

   製法：上述成份混合加熱溶解（一般可不校正pH），分裝試管，121.3℃高壓滅菌15分鍾，趁熱製成斜麵。如不加瓊脂即為(wei) 沙保弱氏液體(ti) 培養(yang) 基。

（7）葡萄糖肉湯：用於(yu) 增菌。

   成分：酵母浸膏3g，構櫞酸鈉3g；牛肉湯1000ml；247g/L硫酸鎂20ml；葡萄糖3g；磷酸氫二鉀2g；5g/L對氨基ben甲酸5ml。

   製法：除葡萄糖及硫酸鎂外，其他各物混和，加熱溶解，校正pH至7.6，再煮沸5分鍾，用濾紙過濾並分裝於(yu) 100ml三角燒瓶中，每瓶50ml，包紮瓶口，121.3℃高壓滅菌15分鍾；將葡萄糖配成100g/L的水溶液，硫酸鎂配成247g/L的水溶液，分別高壓滅菌（葡萄糖為(wei) 113℃）15分鍾，於(yu) 每50ral、無菌肉湯內(nei) 加入滅菌葡萄糖及硫酸鎂水溶液各1ml混勻，於(yu) 37℃培養(yang) 48h。證明無菌生長後存於(yu) 4℃備用。

（8）解脲支原體(ti) 培養(yang) 基：

 成分：牛肉浸液70ml；蛋白腖1.0g；NaCl 0.5g；KH2PO4 0.15g；4.0g/L酚紅0.5mI。

 製法：調pH至6.0，加熱融化後濾紙過濾，121.3℃高壓滅菌，無菌加入小牛血清20ral；250g/L鮮酵母浸液10ml；青黴素20萬(wan) 單位；400g/L尿素（G3濾器過濾除菌）0.5ml，分裝試管，每管4ml。如傾(qing) 注平板，將上述液體(ti) 培養(yang) 基中加入瓊脂粉1.0g。

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