間充質幹細胞成骨誘導分化試劑盒

,成骨誘導液

貨號：YJ-MSCYD-002

價(jia) 格： 1280.0

規格： 100ml    200ml

產(chan) 品描述

本產(chan) 品為(wei) 團隊精心優(you) 化的間充質幹細胞成骨誘導分化試劑盒，可增強間充質幹細胞向成骨細胞分化的能力。

本產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研用途，不可用於(yu) 診斷、治療、臨(lin) 床、家庭及其他用途。

產(chan) 品組成成分及保存

注意：1.為(wei) 保證產(chan) 品的有效性，請避免反複凍融。

2. 配製好的誘導培養(yang) 基保存於(yu) 2-8℃，有效期為(wei) 2周，請根據實驗用量合理配製。

產(chan) 品使用說明

1. 間充質幹細胞成骨誘導分化完全培養(yang) 基的配製

① 室溫條件下融化添加劑及血清。（注意：若添加劑或血清中有沉澱物，屬正常現象，無須過濾，避免成分丟(diu) 失。）

② 根據實驗用量，於(yu) 無菌操作台中配製完全培養(yang) 基，建議每次配製50mL，先加細胞基礎培養(yang) 基和胎牛血清，再加誘導分化添加劑。（配製比例見表一）

                                                                                 表一

2. 間充質幹細胞成骨誘導分化實驗步驟

①包被細胞培養(yang) 瓶/板：向細胞培養(yang) 器皿中加入0.1%明膠溶液，輕微晃動，使包被液完全覆蓋培養(yang) 器皿底麵，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中孵育30min，吸除液體(ti) 即可使用。

②建議取第3~5代、純度達90%以上、狀態良好的間充質幹細胞，將其消化收集，使用含10%FBS的完全培養(yang) 基調整細胞濃度，均勻鋪於(yu) 包被好的培養(yang) 瓶/板中，置於(yu) 37℃，5%CO2，飽和濕度的培養(yang) 箱中培養(yang) 。（細胞接種詳情參考表二）

                                                       表二

③待細胞匯合度達約90%時，即可進行誘導分化。

④小心吸棄細胞培養(yang) 上清，沿孔壁緩慢加入提前配製好的誘導分化完全培養(yang) 基，置於(yu) 37℃恒溫細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。

（注意：完全培養(yang) 基加入細胞前需提前置於(yu) 37℃預熱。）

⑤每2~3day換用新鮮的誘導分化完全培養(yang) 基。換液時，若細胞培養(yang) 上清顏色變為(wei) 澄清的黃色，是由於(yu) 細胞量較大，營養(yang) 消耗較快導致的，請及時縮短換液周期。

⑥細胞誘導2~4周後，即可進行茜素紅染色鑒定。（注意：請在顯微鏡下確認鈣結節形成後，再進行染色鑒定。）

3. 茜素紅染色分析

① 細胞誘導分化結束後，小心吸棄細胞培養(yang) 上清，1×PBS潤洗1~2次，室溫固定30 min。（細胞固定液為(wei) 4%中性甲醛溶液等，體(ti) 積參考表二）

② 吸棄細胞固定液，1×PBS潤洗2次。沿孔壁緩慢加入茜素紅染色液，染液體(ti) 積請參考表二，室溫染色30min。（注意：染色液底部可能會(hui) 有沉澱，吸取時盡量不要觸及底部。若細胞染色後有沉澱，1×PBS洗去即可。）

③ 吸出染色液，1×PBS潤洗，去掉浮色。顯微鏡下觀察細胞染色效果，鈣鹽呈較深的橙紅色。（注意：染色液可重複使用，建議收集。）

質量控製

無菌檢測（細菌、真菌和支原體(ti) 檢測）

pH測試

滲透壓檢測

內(nei) 毒素

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注意事項

僅(jin) 限科研用。
培養(yang) 體(ti) 係中的一些組分是對人體(ti) 健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yang) 體(ti) 係的液體(ti) 和有培養(yang) 體(ti) 係的液體(ti) 殘留的容器內(nei) 部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水衝(chong) 洗即可。

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