血管平滑肌細胞誘導鈣化試劑盒

Vascular Smooth Muscle Cell Calcification Kit

貨號：YJ-YD-005

價(jia) 格： 1280.0

規格： 200ml

產(chan) 品信息

產(chan) 品描述

由團隊精心優(you) 化的血管平滑肌細胞誘導鈣化試劑盒，包括適合血管平滑肌細胞鈣化的基礎培養(yang) 基、鈣化因子和雙抗。

本產(chan) 品可增強VSMCs細胞的鈣化能力。 本產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研用途，不可用於(yu) 診斷、治療、臨(lin) 床、家庭及其他用途。

試劑盒組成部分

使用方法

血管平滑肌細胞誘導鈣化完全培養(yang) 基的配製

1.   使用前，請將鈣化因子置於(yu) 2-8℃環境中過夜解凍直至鈣化因子完全溶解，解凍後輕晃試劑瓶以確保鈣化因子混合均勻，隨後即可使用。

注意：解凍後的鈣化因子中可能會(hui) 含有少量絮狀沉澱，這些物質對產(chan) 品質量無影響。不建議采取 過濾的方法去除沉澱物，此操作會(hui) 導致鈣化因子中部分營養(yang) 物質流失。

2.  用75%乙醇擦拭試劑盒中各瓶/管的開口外壁，室溫放置數秒使酒精揮發。

3. 在超淨台中無菌地打開以上各瓶/管。

4. 將25 mL鈣化因子和2 mL雙抗全部加入173 mL血管平滑肌細胞誘導鈣化基礎培養(yang) 基中，即可配 成200  mL血管平滑肌細胞誘導鈣化完全培養(yang) 基。

注意：

① 無菌吸取少量基礎培養(yang) 基洗滌各瓶/管，盡可能的將所有組分完整的加入基礎培養(yang) 基中。

② 輕晃配製好的完全培養(yang) 基，確保混合均勻之後即可使用。

③ YJ完全培養(yang) 基試劑盒中的每個(ge) 成分均為(wei) 無菌分裝，但為(wei) 確保完全無菌， 也可以將混合後的完 全培養(yang) 基進行再次過濾除菌（0.22 μm 濾膜）。

培養(yang) 器皿表麵的包被

為(wei) 了避免誘導過程中血管平滑肌細胞出現漂浮現象，建議對鈣化誘導使用的培養(yang) 器皿表麵用促貼壁試劑包被。

所需材料

促貼壁試劑（AS01-001D）

操作

1.  加適量促貼壁試劑到培養(yang) 器皿中，能覆蓋整個(ge) 培養(yang) 器皿底麵的量即可。

2. 搖勻液體(ti) 使其覆蓋整個(ge) 培養(yang) 器皿的底麵。

3.  將鋪有促貼壁試劑的培養(yang) 器皿放置在超淨台至少30min。

4.  30 min後棄去促貼壁試劑，待培養(yang) 器皿晾幹後，即可用於(yu) 接種細胞。

注意: 包被促貼壁試劑的培養(yang) 器皿在無菌和不蒸幹的條件下，可以在4℃保存兩(liang) 周。

血管平滑肌細胞誘導鈣化操作規程

所需材料

n 0.25% 胰蛋白酶-EDTA

n Phosphate-Buffered Saline (1×PBS) （貨號：YJ-0800）

n 血管平滑肌細胞完全培養(yang) 基（貨號：PriMed-YJ-004）

n 血管平滑肌細胞誘導鈣化試劑盒（貨號：YJ-YD-004） 操作

注意：本操作規程以六孔板為(wei) 例

1.  將血管平滑肌細胞置於(yu) 37℃，5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

2.  當細胞融合度達到80-90%時，用0.25% 胰蛋白酶-EDTA進行消化。

3. 將消化下來的血管平滑肌細胞按照2×104 cells/cm2 的細胞密度接種在事先包被促貼壁試劑的六孔 板中，每孔加入2 mL完全培養(yang) 基。。

4.  將細胞置於(yu) 37℃，5% CO2的培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。

5.   當細胞融合度達到70%左右時，小心的將孔內(nei) 完全培養(yang) 基吸走，向六孔板中加入2 mL血管平滑肌細胞誘導鈣化完全培養(yang) 基。

6.   每隔2-3天換用新鮮的血管平滑肌細胞誘導鈣化完全培養(yang) 基（使用前需預熱至37℃）

7. 誘導15-20天後，視細胞的形態變化及生長情況，用鈣化鑒定試劑盒進行染色。

注意：為(wei) 防止誘導後的細胞脫落，建議鈣化過程中出現大量鈣結節之後，換液形式變為(wei) 每兩(liang) 天一次半量換液。

產(chan) 品穩定性及保存條件

1.所有產(chan) 品均需避光保存。

2.保存條件及有效期

3.所有產(chan) 品請於(yu) 保質期內(nei) 使用，超過保質期，必須放棄使用。

4.為(wei) 確保產(chan) 品效果，請避免反複凍融相關(guan) 產(chan) 品。

質量控製

血管平滑肌細胞鈣化誘導培養(yang) 基已用各種屬血管平滑肌細胞進行了性能測試。

主要的鑒定標準包括：

•   無菌檢測（細菌、真菌和支原體(ti) 檢測）

•   pH測試

•   滲透壓檢測

•   內(nei) 毒素檢測

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