當前位置:
首頁 > 技術文章 > 人膽囊上皮細胞永生化+GFP傳代/複蘇技巧
目錄導航 Directory
服務熱線
技術支持Article
人膽囊上皮細胞永生化+GFP傳代/複蘇技巧
點擊次數:408 更新時間:2024-08-19

人膽囊上皮細胞永生化+GFP

Immortalization of human gallbladder epithelial cells

貨號:YJ-004a(免疫熒光鑒定)

價(jia) 格: 3200.0

規格: 5*10 5

細胞詳述

膽囊,是位於(yu) 右方肋骨下肝髒後方的梨形囊袋構造,有濃縮和儲(chu) 存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。

膽囊內(nei) 麵以粘膜覆蓋,有發達的皺襞。膽囊收縮排空時,皺襞高大而分支;膽囊充盈時,皺襞減少變矮。粘膜上皮為(wei) 單層柱狀,內(nei) 分散分部著少量杯狀細胞。膽囊粘膜細胞具有典型的吸收型細胞的特征,具有較強的吸收和濃縮功能,上皮細胞吸收膽汁中的水和無機鹽,經細胞側(ce) 麵的質膜轉運至上皮細胞間隙內(nei) ,吸收的水和無機鹽通過基膜進入固有層的血管和淋巴管內(nei) 。同時,膽囊粘膜亦有分泌功能,分泌粘液。

該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。

細胞特性

1) 細胞來源於(yu) 人膽囊組織。

2) 細胞鑒定:細胞角蛋白19(CK-19)免疫熒光染色為(wei) 陽性。

3) 經鑒定細胞純度高於(yu) 90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yang) 。

細胞篩選

該細胞為(wei) 穩定轉染GFP的細胞,隨細胞傳(chuan) 代次數的增加,其GFP熒光強度會(hui) 逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤黴素進行再次篩選。

建議收到細胞後至少傳(chuan) 3代,凍存留種後再進行篩選。

初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為(wei) 1ug/ml嘌呤黴素的完全培養(yang) 基維持培養(yang) ,若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為(wei) 含2ug/ml嘌呤黴素的完全培養(yang) 基繼續篩選,以此類推,至最高藥物濃度為(wei) 5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大於(yu) 60%,則停止篩選,換成正常培養(yang) 基培養(yang) ,至細胞密度約80%,可繼續加入同濃度嘌呤黴素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤黴素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養(yang) 基正常培養(yang) 。

產(chan) 品的運輸和保存

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與(yu) 客戶協商後選擇下述方式中的一種進行。

1) 1mL凍存細胞懸液裝於(yu) 1.8ml的凍存管中,置於(yu) 裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養(yang) ,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個(ge) 月。

2) T-25培養(yang) 瓶充滿完全培養(yang) 基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳(chuan) 代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yang) 瓶至於(yu) 培養(yang) 箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

產(chan) 品使用

1) 本產(chan) 品僅(jin) 能用於(yu) 科研

2) 本產(chan) 品未通過直接用於(yu) 活體(ti) 動物和人的審核

3) 本產(chan) 品未通過用於(yu) 活體(ti) 診斷的審核

 


從(cong) 2011年開始我們(men) 致力於(yu) 在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作夥(huo) 伴!

如果您受時間、試驗條件等限製而無法完成您的課題研究,歡迎您與(yu) 我們(men) 聯係。

 

實驗技術服務: