K562/ADR K562耐阿黴素細胞株
K562 Resistant Adriamycin Cell Line
貨號：YJ-h119（STR鑒定）
價(jia) 格： 2500.0
規格： 1*106
細胞介紹
K562/ADR為(wei) 由K562細胞構建的耐ADR藥物細胞株。
細胞特性
1）來源：人慢性髓係白血病細胞耐藥篩選 | 2）形態：淋巴母細胞樣；圓形，懸浮生長 |
3）含量：>1×10^6 細胞數 | 4）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 |
5）用途：僅(jin) 供科研使用。 |
細胞運輸、保存及注意事項
複蘇細胞 | 凍存細胞 | |
包裝 | 充液的T25細胞培養(yang) 瓶 | 1mL凍存管 |
運輸條件 | 常溫 | 幹冰 |
保存方式 | 37℃恒溫細胞培養(yang) 箱 | -80℃冰箱中保存過夜後轉入液氮 或立即複蘇 |
※注意事項 | 1. 收到細胞後，若發現培養(yang) 瓶破損、漏液及細胞有汙染；或凍存管有破損，融化、漏液等，請立即拍照並聯係我們(men) 。照片包括細胞培養(yang) 瓶/凍存管外觀，顯微鏡下細胞照片（100倍，200倍各2張）； 2. 複蘇細胞的充液培養(yang) 基為(wei) 不含藥物的維持培養(yang) 基，血清濃度較低，收到細胞後請及時更換為(wei) 完全培養(yang) 基； 3. 建議收到細胞後，首先進行擴增（至少3代），並凍存部分細胞以備用。 4. 初次培養(yang) ，當細胞密度達8×105個(ge) /mL時，可加入500ng/mL ADR的完全培養(yang) 基培養(yang) ，至細胞細胞密度達1×10^6個(ge) /mL後傳(chuan) 代。細胞傳(chuan) 代1~2次後仍能保持增殖，即可提高藥物濃度至1ug/mL繼續培養(yang) ；若此過程中細胞停止增殖，且狀態較差，則需降低藥物濃度（首次降低一半藥物濃度）或使用不含藥物的完全培養(yang) 基培養(yang) ，至細胞密度達8×105個(ge) /mL，且生長狀態較好時，再更換為(wei) 所需的ADR藥物濃度。 5. 細胞凍存過程中，不可添加藥物。 | |
細胞培養(yang) 試劑的配製
1）ADR藥物的配製及保存
建議將ADR藥物配製成1mg/mL的母液，即使用10mL PBS溶液溶解10mg ADR藥物，使其完全溶解後，使用0.22um濾器過濾除菌。
注意：可根據用量配置藥物，並將藥物分裝保存，避免反複凍融導致藥物失效。溶解後的ADR，4℃保存1周，-20℃保存1個(ge) 月，-80℃保存6個(ge) 月。
2）凍存液的配製
90%優(you) 質胎牛血清+10%DMSO，現用現配。（凍存液中不含藥物）
3）完全培養(yang) 基的配製（推薦使用YJ-h119-001b）
成分 | 體(ti) 積/濃度 |
優(you) 質胎牛血清 | 10% |
雙抗 | 1% |
1ug/mL ADR | 0.1%母液（1mg/mL） |
RPMI-1640培養(yang) 基 | 補充至所需體(ti) 積 |
細胞培養(yang) 條件
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%~80%。
細胞處理
1）凍存細胞的複蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4~6mL完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻，1000rpm/min離心3~5min，棄去上清液。加入1mL完全培養(yang) 基重懸細胞後，均勻鋪於(yu) 含6~8mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或皿）中，置於(yu) 37℃恒溫細胞培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
注意：①細胞複蘇過程中，不可使用含有藥物的培養(yang) 基。須在細胞密度達約8×105個(ge) /mL時，方可添加500ng/mL ADR藥物；若細胞生長狀態較為(wei) 緩慢，可適當降低ADR的濃度（首次降低一半藥物濃度），或使用不含ADR的完全培養(yang) 基培養(yang) 至細胞生長狀態較好時，再更換為(wei) 所需的ADR濃度。
②建議複蘇細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護麵罩，避免凍存管處於(yu) 溫差較大情況下發生爆炸，造成人員傷(shang) 害。
2）細胞傳(chuan) 代（建議以同等底麵積的培養(yang) 瓶/皿按照1：2比例傳(chuan) 代）
懸浮狀態下生長的細胞，可以通過向培養(yang) 瓶中添加完全培養(yang) 基來維持細胞的生長狀態，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×10^6個(ge) /mL，可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yang) 液後重懸混勻後將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL按照說明書(shu) 要求配置的新的完全培養(yang) 基以保持細胞的生長活力，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
注意：細胞傳(chuan) 代1~2次後仍能保持增殖，即可提高藥物濃度至1ug/mL繼續培養(yang) ；若此過程中細胞停止增殖，且狀態較差，則需降低藥物濃度（首次降低一半藥物濃度）或使用不含藥物的完全培養(yang) 基培養(yang) ，至細胞密度約8×105個(ge) /mL，且生長狀態較好時，再更換為(wei) 所需的ADR藥物濃度。
3）細胞凍存
①細胞凍存時，收集細胞懸液到離心管中，1000rpm，離心5min，棄去上清。
②細胞計數後，加入配製好的細胞凍存液，重懸細胞，按照1×10^6 ~ 1×107個(ge) 細胞/mL分配到一個(ge) 凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。
注意：細胞凍存過程中，不可添加藥物。
③將要凍存的細胞置於(yu) 程序降溫盒中，-80℃冰箱中過夜，之後轉入液氮容器中儲(chu) 存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便後續查閱和使用。
注意事項
1.收到細胞後，若發現幹冰已揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有汙染，請立即與(yu) 我們(men) 聯係。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精後放在培養(yang) 箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，並對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體(ti) 外觀拍一張照片，觀察培養(yang) 基的顏色和是否有漏液情況，隨後在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有汙染情況。作為(wei) 我方進行銷售依據。
3.由於(yu) 細胞狀態受環境、操作和運輸等多方麵因素影響，故本公司隻保證客戶收到細胞後一周內(nei) 的細胞狀態，故客戶需要售後時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題後客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大於(yu) 7天。
4.所有動物細胞均視為(wei) 有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台內(nei) 操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丟(diu) 棄。
從(cong) 2011年開始我們(men) 致力於(yu) 在生命科學領域、生物醫學實驗技術及論文潤色服務，協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年，是您值得信賴的科研合作夥(huo) 伴!
如果您受時間、試驗條件等限製而無法完成您的課題研究，歡迎您與(yu) 我們(men) 聯係。
實驗技術服務：
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