間充質幹細胞成脂誘導分化試劑盒

,成脂誘導液

貨號：YJ-MSCYD-004

價(jia) 格： 1780.0

規格： 200ml

產(chan) 品描述

本產(chan) 品為(wei) 團隊精心優(you) 化的間充質幹細胞成脂誘導分化試劑盒，可增強間充質幹細胞向成脂細胞分化的能力。

本產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研用途，不可用於(yu) 診斷、治療、臨(lin) 床、家庭及其他用途。

產(chan) 品組成成分及保存

Ø 注意：

1.為(wei) 保證產(chan) 品的有效性，請避免反複凍融。

2.配製好的誘導培養(yang) 基保存於(yu) 2-8℃，有效期為(wei) 2周，請根據實驗用量合理配製。

產(chan) 品使用說明

1. 成脂誘導分化完全培養(yang) 基的配製

①室溫條件下融化各因子及血清。各因子融化後，瞬時離心，使溶液集中於(yu) 離心管底部。（注意：若因子或血清中有沉澱物，屬正常現象，無須過濾，避免成分丟(diu) 失。）

②根據實驗用量，於(yu) 無菌操作台中配製誘導分化完全培養(yang) 基，建議每次配製50mL，配製比例見下表：

2. 成脂誘導分化實驗步驟

①建議取第3~5代、純度達90%以上、狀態良好的間充質幹細胞，將其消化下來，離心收集，使用間充質幹細胞完全培養(yang) 基調整細胞密度為(wei) 1~5×10 5個(ge) cell/mL，均勻鋪於(yu) 6孔板中，每孔2mL，置於(yu) 37℃恒溫細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。

（注意：此處細胞密度及培養(yang) 液體(ti) 積以6孔板為(wei) 例，若為(wei) 其它培養(yang) 器皿，請根據實際情況調整細胞密度及培養(yang) 液體(ti) 積。）

②待細胞匯合度達80%~100%時，即可進行誘導分化。

③小心吸棄細胞培養(yang) 上清，沿孔壁緩慢加入提前配製好的誘導分化完全培養(yang) 基，每孔2mL，置於(yu) 37℃恒溫細胞培養(yang) 箱中培養(yang) 。

（注意：完全培養(yang) 基加入細胞前需提前置於(yu) 37℃預熱。）

③每2day換用新鮮的誘導分化完全培養(yang) 基。換液時，若細胞培養(yang) 上清顏色變為(wei) 澄清的黃色，是由於(yu) 細胞量較大，培養(yang) 基消耗較快導致的，請及時調整為(wei) 每日換液。

（注意：完全培養(yang) 基加入前需提前置於(yu) 37℃預熱。）

④細胞誘導3周後，即可進行油紅O染色鑒定。

3. 油紅染色分析

①細胞誘導分化結束後，小心吸棄細胞培養(yang) 上清，1×PBS潤洗1~2次。每孔加入1mL細胞固定液（4%中性甲醛溶液等），室溫固定30 min。

②配製油紅O工作液：油紅O貯存液與(yu) 蒸餾水按照3：2配製，（例：油紅O貯存液3mL，蒸餾水2mL），混勻。使用濾紙過濾，收集濾液，即為(wei) 油紅O工作液。

（注意：成脂細胞內(nei) 的油滴極易脫落，操作時須謹慎。）

③細胞固定完成後，吸棄細胞固定液，1×PBS潤洗2次。沿孔壁緩慢加入油紅O染色液，每孔1mL，室溫染色30min。

（注意：油紅O工作液底部可能會(hui) 有沉澱，吸取時盡量不要觸及底部。若細胞染色後有沉澱，PBS洗去即可。）

④吸出染色液，PBS潤洗，去掉浮色。顯微鏡下觀察細胞染色效果。細胞內(nei) 油滴著色，呈紅色。

（注意：油紅O工作液不可重複使用，不建議回收。）

質量控製

無菌檢測（細菌、真菌和支原體(ti) 檢測）

pH測試

滲透壓檢測

內(nei) 毒素

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注意事項

僅(jin) 限科研用。
培養(yang) 體(ti) 係中的一些組分是對人體(ti) 健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yang) 體(ti) 係的液體(ti) 和有培養(yang) 體(ti) 係的液體(ti) 殘留的容器內(nei) 部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水衝(chong) 洗即可。

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