RAW 264.7 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

Mouse Monocyte - macrophage Leukemia Cells ,RAW264.7

貨號：YJ-m047（種屬鑒定）

價(jia) 格： 1350.0

規格： 1*10⁶

細胞描述

此細胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表麵抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性。可以胞飲中性紅並吞噬乳膠顆粒與(yu) 酵母聚糖。可以抗體(ti) 依賴性地分解綿羊紅血球與(yu) 腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導分解紅血球但對腫瘤靶細胞無作用。

細胞特性

1） 來源：鼠科白血病病毒誘導的腫瘤；單核細胞；巨噬細胞

2） 形態：不規則圓形，紡錘狀，貼壁細胞，少量懸浮。

3） 含量：>1x10^6  細胞數

4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5） 用途：僅(jin) 供科研使用。

運輸和保存

幹冰運輸及複蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝幹冰運輸，收到後-80度冰箱保存過夜後轉入液氮或直接複蘇，若發現幹冰已揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有汙染，請立即與(yu) 我們(men) 聯係。

（2）T25瓶複蘇的存活細胞常溫發貨，收到後按照細胞接收後的處理方法操作。

細胞接收後的處理

1）收到細胞後，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h，若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染，請拍照後及時聯係我們(men) 。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存，作為(wei) 售後時收到時細胞狀態的依據。

3）半貼細胞或貼壁不牢（懸浮）細胞：T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細胞的情況，若細胞密度在60%以下，客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心後用完全培養(yang) 基重懸後打回到原培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) ，若細胞生長70%-90%對細胞進行傳(chuan) 代，傳(chuan) 代時需要收集培養(yang) 基中懸浮的細胞離心後回收。

4）備注：運輸用的培養(yang) 基（灌液培養(yang) 基）不能再用來培養(yang) 細胞，請換用按照說明書(shu) 細胞培養(yang) 條件新配製的完全培養(yang) 基來培養(yang) 細胞。  收到細胞後第一次傳(chuan) 代建議T25培養(yang) 瓶1：2傳(chuan) 代 。

一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：

1） 準備DMEM(包含2mM L-穀氨酰胺，0.11g / L丙酮酸鈉) (推薦YJ-0001)培養(yang) 基；優(you) 質胎牛血清10 %；P/S青黴素-鏈黴素 1%。

2） 注意事項：

（a）在細胞生長的初始階段，細胞以貼壁的形式生長並呈現出長方體(ti) 的形態和有“偽(wei) 足"延伸。隨著培養(yang) 時間的增加，細胞呈現圓形並以疊加的形式生長。細胞密度達到一定的程度，會(hui) 有細胞以懸浮的方式散落到到培養(yang) 基中，鏡下觀察會(hui) 發現懸浮和貼壁的細胞會(hui) 同時出現。

（b）該細胞傳(chuan) 代時不需要用胰酶消化。傳(chuan) 代時，用無菌細胞刮刮拭培養(yang) 表麵將細胞刮落，收集離心後重懸接種到新的培養(yang) 瓶中。

（c）該細胞形態上包含鬆散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形。當細胞密度較大時，細胞會(hui) 輕微脫落變圓或者許多細胞堆積在一起，有些細胞甚至脫落漂浮。這些漂浮的細胞是存活的，在傳(chuan) 代時應收集起來，離心後細胞沉澱可以繼續培養(yang) 。（d）血清質量差異可能引起細胞貼壁能力變化，應選用高質量的胎牛血清。

3） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。

4） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1）凍存細胞的複蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yang) 基重懸細胞。然後將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或皿）中37℃培養(yang) 過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達70%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

該細胞為(wei) 懸浮和輕微的貼壁細胞，傳(chuan) 代可以參考以下方法：

該細胞用細胞刮鏟替代胰酶來對細胞進行處理。用無菌細胞刮鏟刮拭細胞附著培養(yang) 表麵將細胞刮落，收集細胞後離心去上清，重懸後接種到新的裝有新鮮培養(yang) 液的培養(yang) 瓶內(nei) 。收貨後第一次傳(chuan) 代1:2進行，後續可以根據實際的情況以1:2~1:4的比例進行傳(chuan) 代。

3） 細胞凍存: 收到細胞後建議在培養(yang) 前3代時凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。

下麵T25瓶為(wei) 例；

1. 1，細胞用細胞刮鏟替代胰酶來對細胞進行處理。用無菌細胞刮鏟刮拭細胞附著培養(yang) 表麵將細胞刮落，收集細胞。

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配製好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個(ge) 活細胞/ml分配到一個(ge) 凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

將要凍存的細胞置於(yu) 程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之後轉入液氮容器中儲(chu) 存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便後續查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞後，若發現幹冰已揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有汙染，請立即與(yu) 我們(men) 聯係。

2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精後放在培養(yang) 箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，並對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體(ti) 外觀拍一張照片，觀察培養(yang) 基的顏色和是否有漏液情況，隨後在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有汙染情況。作為(wei) 我方進行銷售依據。

3.由於(yu) 細胞狀態受環境、操作和運輸等多方麵因素影響，故本公司隻保證客戶收到細胞後一周內(nei) 的細胞狀態，故客戶需要售後時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題後客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大於(yu) 7天。

4.所有動物細胞均視為(wei) 有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台內(nei) 操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丟(diu) 棄。

從(cong) 2011年開始我們(men) 致力於(yu) 在生命科學領域、生物醫學實驗技術及論文潤色服務，協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年，是您值得信賴的科研合作夥(huo) 伴!

如果您受時間、試驗條件等限製而無法完成您的課題研究，歡迎您與(yu) 我們(men) 聯係。

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