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NCTC clone 1469小鼠肝上皮細胞傳代/複蘇技巧
點擊次數:408 更新時間:2024-07-04

NCTC clone 1469小鼠肝上皮細胞

Mouse Liver Epithelial Cells ,NCTC clone 1469

貨號:YJ-m038(種屬鑒定)

價(jia) 格: 1800.0

規格: 1*106

細胞介紹

1952年建係,源於(yu) 正常C3H/An小鼠的肝髒組織,表達H-2K抗原,鼠痘病毒陰性。

細胞特性

1 來源:小鼠的肝組織

2 形態:上皮細胞樣,貼壁生長

3 含量:>1x106 個(ge) /mL

4 汙染:支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌檢測為(wei) 陰性

5 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

對於(yu) 貼壁細胞傳(chuan) 代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中(T251-2mLT752-3mL),置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入3-4ml10%FBS的培養(yang) 基來終止消化。 

3.輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書(shu) 要求配置的新的完全培養(yang) 基以保持細胞的生長活力,後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞後建議在培養(yang) 前3代時凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。


下麵T25瓶為(wei) 例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳(chuan) 代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決(jue) 定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為(wei) 1×106~1×107個(ge) 活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配製好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個(ge) 活細胞/ml分配到一個(ge) 凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置於(yu) 程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之後轉入液氮容器中儲(chu) 存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便後續查閱和使用。


 

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