MV-4-11 人髓性單核細胞白血病細胞
,MV411
貨號：YJ-h381(STR鑒定)
價(jia) 格： 1500.0
規格： 1*106
細胞介紹
MV-4-11細胞係由Rovera課題組建立，來源於(yu) 一名患有人雙表型髓性單核細胞白血病（biphenotypic B myelomonocytic leukemia）的10歲男孩的外周血。Interleukin (IL)-3可以獨立地支持該細胞長期生長，使用10%FBS培養(yang) 時則不需要額外添加IL-3。但是，在IL-3和生長因子Granulocyte/Macrophage Colony-Stimulating Factor （GM-CSF）均處於(yu) 低濃度的情況下，IL-3會(hui) 抑製MV-4-11細胞的增殖。
生長因子Granulocyte Colony Stimulating Factor（G-CSF）會(hui) 協同GM-CSF促進MV-4-11細胞的增殖，而單獨的G-CSF會(hui) 短暫刺激該細胞係。據文獻[PubMed: 3500218]報道，間接免疫熒光法檢測髓性單核細胞抗原CD15，超過96%的該細胞為(wei) 陽性，40~96%為(wei) 單核細胞抗原CD4陽性，4-11%為(wei) 單核細胞抗原CD10陽性。
細胞特性
1） 來源：男性，10歲 外周血
2） 形態：成淋巴細胞狀，懸浮生長
3） 含量：>1x10^6 細胞數
4） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途：僅(jin) 供科研使用。
運輸和保存
幹冰運輸及複蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝幹冰運輸，收到後-80度冰箱保存過夜後轉入液氮或直接複蘇，若發現幹冰已揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有汙染，請立即與(yu) 我們(men) 聯係。
（2）T25瓶複蘇的存活細胞常溫發貨，收到後按照細胞接收後的處理方法操作。
細胞接收後的處理
1） 收到細胞後，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱放置約2-3h，若發現培養(yang) 瓶破損、有液溢出及細胞有汙染，請拍照後及時聯係我們(men) 。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yang) 瓶外觀照片一張留存，作為(wei) 售後時收到時細胞狀態的依據。
一．培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備：
1） 準備IMDM（推薦YJ-0008）培養(yang) 基；優(you) 質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
備注：
a) 該細胞為(wei) 懸浮細胞，傳(chuan) 代時使用【半換液法】對細胞狀態較為(wei) 有利，因此我庫建議您使用【半換液法】進行傳(chuan) 代。如你收到的細胞為(wei) 15ML離心管發貨的細胞，請不要通過離心的方式收集細胞，可以直接向培養(yang) 瓶中添加等體(ti) 積的新鮮培養(yang) 液，然後將細胞吹打均勻後移入兩(liang) 個(ge) 新的T25培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 即可。如你收到的細胞為(wei) T25培養(yang) 瓶發貨的細胞，通過離心收集細胞後，添加8-10ml按照要求配置的新鮮培養(yang) 液然後將細胞吹打均勻後移入兩(liang) 個(ge) 新的T25培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 即可。
後續建議您使用【半換液法】進行傳(chuan) 代。
b) 細胞對血清質量較為(wei) 敏感，我庫建議您使用進口大品牌優(you) 質血清進行培養(yang) 。
c) 該細胞對細胞密度較為(wei) 敏感，培養(yang) 、傳(chuan) 代時請注意保持細胞密度在合適的範圍。細胞接種密度20萬(wan) 個(ge) /mL ，培養(yang) 時維持細胞密度在10萬(wan) -100萬(wan) 個(ge) /mL
2） 培養(yang) 條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二． 細胞處理：
1） 凍存細胞的複蘇：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yang) 基重懸細胞。然後將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或皿）中37℃培養(yang) 過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2） 細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
對於(yu) 懸浮細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
懸浮狀態下生長的細胞，可以通過向培養(yang) 瓶中添加完全培養(yang) 基來維持細胞的生長狀態，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×10^6個(ge) /mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yang) 液後重懸混勻後將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書(shu) 要求配置的新的完全培養(yang) 基以保持細胞的生長活力，後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3） 細胞凍存: 收到細胞後建議在培養(yang) 前3代時凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。
下麵T25瓶為(wei) 例；
1. 細胞凍存時按照細胞傳(chuan) 代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決(jue) 定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為(wei) 1×10^6~1×107個(ge) 活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配製好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個(ge) 活細胞/ml分配到一個(ge) 凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。
將要凍存的細胞置於(yu) 程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之後轉入液氮容器中儲(chu) 存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便後續查閱和使用。
注意事項
1.收到細胞後，若發現幹冰已揮發幹淨、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有汙染，請立即與(yu) 我們(men) 聯係。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精後放在培養(yang) 箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，並對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體(ti) 外觀拍一張照片，觀察培養(yang) 基的顏色和是否有漏液情況，隨後在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有汙染情況。作為(wei) 我方進行銷售依據。
3.由於(yu) 細胞狀態受環境、操作和運輸等多方麵因素影響，故本公司隻保證客戶收到細胞後一周內(nei) 的細胞狀態，故客戶需要售後時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題後客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大於(yu) 7天。
4.所有動物細胞均視為(wei) 有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全台內(nei) 操作，並請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丟(diu) 棄。
從(cong) 2011年開始我們(men) 致力於(yu) 在生命科學領域、生物醫學實驗技術及論文潤色服務，協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年，是您值得信賴的科研合作夥(huo) 伴!
如果您受時間、試驗條件等限製而無法完成您的課題研究，歡迎您與(yu) 我們(men) 聯係。
實驗技術服務：
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