尿素氮（BUN）試劑盒說明書(shu)

微量法

注意：正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi)

尿素是生物體(ti) 內(nei) 含氮化合物分解的終產(chan) 物，在尿酶催化下分解轉化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。

測定原理

在堿性條件下，尿酶水解尿素產(chan) 生氨，氨與(yu) 次氯酸反應生成氯胺，再與(yu) 酚衍生物作用生成綠色吲哚酚，在 630nm 處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀(yi) 器

天平、研缽、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配製

標準品：液體(ti) 1mL×1 支，4℃保存。

試劑一：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨(lin) 用前加 4mL 蒸餾水充分溶解。

試劑二：液體(ti) 8mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體(ti) 8mL×1 瓶，4℃避光保存。

樣品處理

1. 組織：按照質量（g）：蒸餾水體(ti) 積(mL)為(wei) 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，勻漿後於(yu) 25℃，10000g 離心10min，取上清待測。

2. 細胞：按照細胞數量（104個(ge) ）：蒸餾水體(ti) 積（mL）為(wei) 500~1000：1的比例（建議500萬(wan) 細胞加入1mL蒸餾水），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）； 然後 4℃，10000g離心10min，取上清置於(yu) 冰上待測。

3. 血清或其它液體(ti) ：直接檢測。

測定操作

注意：空白管和標準管隻需測定一次