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蛋白銀染試劑盒說明書
點擊次數:1279 更新時間:2020-09-02

  

蛋白銀染試劑盒說明書(shu)

 

Protein Silver Stain Kit

蛋白銀染試劑盒

 

目錄號:K2012

 

 

保存條件:室溫保存。

 

組分說明

 

      Cat. No.                     K2012

    Kit Size                       20次

   Silver Stain Sensitizer(500×)      2×1 ml

   Silver Stain Enhancer              3ml

  Silver Stain                     2×250 ml

 Silver Stain Developer            4×125 ml

 

產(chan) 品簡介

 

  本試劑盒采用高靈敏度的銀染染料,可應用於(yu) 變性膠及非變性膠的蛋白染色,具

有目的條帶清晰、背景低,操作時間可靈活控製的優(you) 點。另外,本試劑盒增加了一步

短時敏化作用步驟,可明顯降低背景及提升目的條帶的亮度。

 

注意事項

 

1.操作時請使用去離子水和潔淨的玻璃或塑料器皿,須戴一次性手套進行操作。

2.整個(ge) 銀染過程需在搖床上進行,搖床轉速約60 rpm左右。

3.需自備乙醇,冰醋酸。

 

本產(chan) 品僅(jin) 供科研使用,請勿用於(yu) 臨(lin) 床診斷及其他用途

 

使用說明

 

  以下操作步驟中各溶液的用量以大小為(wei) 8.5×5.5 cm、厚度為(wei) 1.0 mm的凝膠為(wei) 例,以凝膠全部浸沒到溶液為(wei) 準,一般用量25 ml。對於(yu) 大型凝膠,各溶液的使用量需按凝膠體(ti)

積的比列放大。請提前準備好50 ml固定液(超純水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50 ml洗脫液(10%乙醇)和50 ml終止液(5%的冰醋酸)。

1.水洗:電泳完成後,用超純水洗膠2次,每次洗滌5分鍾。

2.固定:用25 ml固定液固定凝膠2次,每次固定15分鍾。

3.洗脫:固定完成後用洗脫液洗膠2次,每次洗滌5分鍾。

4.水洗:用超純水洗膠2次,每次洗滌5分鍾。

5.增敏:將上一步洗好的凝膠置於(yu) 銀染增敏工作液中,室溫下準確孵育1分鍾後用超純水洗膠3次,每次洗滌20秒。

     銀染增敏工作液的配製:取50 µl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25 ml超純水中,混勻。

6.銀染:棄去超純水,將凝膠置於(yu) 銀染工作液中孵育30分鍾。

 

銀染工作液的配製:取25ml Silver Stain加入50 µl Silver Stain Enhancer混勻。

7.水洗:用超純水快速洗膠2次,每次洗滌準確控製為(wei) 20秒。

8.顯影:立即將洗好的凝膠浸沒在顯影液中,室溫孵育2-3分鍾,直至蛋白條帶顯示清晰。

 

  顯影液的配製:取25ml Silver Stain Developer加入30µl Silver Stain Enhancer混勻。

注意:顯影30秒內(nei) ,蛋白條帶開始顯現,繼續顯影至2-3分鍾。若蛋白條帶顯色較淺,可適當延長顯影時間至5分鍾及以上。

9.終止:用終止液洗去凝膠上的顯影液後,將凝膠浸泡在新的終止液中反應10分鍾。

 

    

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