SDS-PAGE濃縮膠緩衝(chong) 液（4×）說明書(shu)

Stacking Gel Solution (4×)

目錄號：K0025

保存條件：2-8℃保存。

組分說明

                      Cat No.          K0025A

                      Volume             200 ml

             本產(chan) 品僅(jin) 供科研使用，請勿用於(yu) 臨(lin) 床診斷及其他用途  

產(chan) 品簡介

　　本產(chan) 品為(wei) 配製 SDS-PAGE濃縮膠緩衝(chong) 液，可用於(yu) 配製各種濃度的變性及非變性

PAGE凝膠，方便、快捷。產(chan) 品中已加入10%SDS,使用時不用另外加入。

操作步驟

根據目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配製濃度，*j膠濃度請參考附表1。

 I 灌製分離膠（各試劑使用量請參考附表2）

1．參照凝膠模具說明書(shu) ，裝配好凝膠模具。

   注：加入上層篩板有助於(yu) 加樣時保持填料與(yu) 樣品均勻接觸，是否加入上層篩板可根據實際情況選擇。

2．將不同體(ti) 積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩衝(chong) 液和雙蒸水在小燒杯或試管中混合。

3．加入10%APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產(chan) 生氣泡。

4．在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液（對於(yu) mini-gel，凝膠液加至約距前玻璃板頂端

   1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可），然後在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-5 cm的水層，

   使凝膠表麵保持平整。

5．靜置30-60分鍾，待分離膠和水層之間出現一個(ge) 清晰的界麵後，表麵凝膠已聚合。

 II灌製濃縮膠（各試劑使用量請參考附表3）

1．去除覆蓋在分離膠上的水層。

2．將不同體(ti) 積的30%Acr-Bis(29:1)、濃縮膠緩衝(chong) 液和雙蒸水在一個(ge) 小燒杯或試管中混

   合。

3．加入10%過硫酸銨和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產(chan) 生氣泡。

4．將濃縮膠溶液加至分離膠的上麵，直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端。

5．將梳子插入凝膠內(nei) ，避免產(chan) 生氣泡。

6．靜置10~20分鍾，等待濃縮膠聚合。

7．待凝膠聚合後，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。

8．進行常規電泳操作。

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