抗原修複應注意的問題

操作中還應注意如下問題：1，熱處理後應注意自然冷卻。2.熱處理時要防止切片幹燥。3，應根據不同的抗體(ti) 選擇合適的抗原修複方法。4，同一批抗原的檢測所用溫度和時間確保一致。5，注意形態學結構的改變（一般經高溫修複後胞漿會(hui) 明顯被破壞，對細胞核的影響較大，會(hui) 出現核破裂與(yu) 蘇木到淡染等現象；而經酶水解的切片，其細胞漿破壞視消化時間長短而異，但核破壞較輕）。6，如果在常用的緩衝(chong) 液中無法實現抗原修複，或經修複後的抗原定位發生改變，可改用一些不常用的緩衝(chong) 液，或加一些螯合劑，如EDTA等可改善某些抗原的修複。

 用於(yu) 免疫酶組織化學抗原修複的消化酶很多，所選酶的種類、使用的濃度、pH、消化時間及溫度等均要視組織固定的不同，所檢測抗原的性質與(yu) 組織類型的不同而異，應通過預實驗摸索確定。使用酶消化的原則：胰蛋白酶和蛋白酶K一般用於(yu) 細胞內(nei) 抗原，如Keratin,CEA與(yu) GFAP等。胃蛋白酶則主要用於(yu) 細胞間質抗原的檢測。如fibronectin,Laminin與(yu) 各型膠原等。一般來說，消化時間和組織切片固定的長短呈正比。在用酶消化與(yu) 熱修複後均不能獲得結果的前提下使用抗原修複與(yu) 酶消化結合的方法，有時會(hui) 取得較為(wei) 滿意的結果。一般常用蛋白酶K和微波相結合，但應注意，無論何種性質的抗原檢測均可能會(hui) 在核內(nei) 出現假陽性反應。因此必須要做對照。

書(shu)