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ELISA分析儀器
點擊次數:3502 更新時間:2018-08-14

ELISA分析儀(yi) 器

    ELISA試劑技術20世紀80年代引入中國,現已被廣泛應用。與(yu) 之相關(guan) 的分析儀(yi) 器也得到了快速發展,我國先後出現了十餘(yu) 家酶標儀(yi) 、洗板機生產(chan) 廠商,在中國市場上與(yu) 眾(zhong) 多的進口酶標儀(yi) 器進行緊張競爭(zheng) 。下麵分三個(ge) 方麵對ELISA中有關(guan) 儀(yi) 器及其在中國的應用作一簡要介紹。

    分離式酶聯免疫儀(yi) 器

    分離式酶聯免疫儀(yi) 器主要有酶標儀(yi) 、洗板機。在血清離心之後,經過加樣、洗板、孵育等過程,後通過吸光度判定結果。ELISA實驗在國內(nei) 主要用於(yu) 定性檢驗,故目前的分離式儀(yi) 器基本上可以滿足。

    酶標儀(yi) 本質上是一台於(yu) 微孔板的、可見光範圍的光電比色計。在ELISA實驗中,酶標儀(yi) 是測定各微孔中試樣的吸光度的關(guan) 鍵儀(yi) 器,對試驗結果的判定有直接影響,是實驗室*的重要儀(yi) 器之一。隨著ELISA技術的普及,酶標儀(yi) 得到了很大發展,產(chan) 品種類齊全,型號多樣,各有特色。目前國內(nei) 市場上銷售的酶標儀(yi) 已*擺脫原來的單孔測量方式,整板測量、定性定量計算、存儲(chu) 、多種報告格式、濾光片自動轉換等已成為(wei) 基本的、*的功能,各種新推出的酶標儀(yi) 性能日益完善,功能不斷擴充。具體(ti) 有:

  • 測量高速化  從目前不斷推出的酶標儀趨勢來看,整板測量速度均在10s以內,這有利於防止測量過程中各微孔吸光度的微小變化,盡可能克服環境對結果的影響,同時可以滿足動力測量的要求,測量速度在20s以上的儀器將處於不利於地位。我國現生產的酶標儀,測量整板速度一般為25s,產品更新周期較長。
  • 寬吸光度範圍   盡管酶標儀A=0-2.5的吸光度範圍*可以滿足實驗的要求,但國外新推出的儀器都擴寬了早期型號的吸光度範圍,較的酶標儀其線性範圍可以達到A=4.0,並且保持很好的精密度,如BIORAD公司的Benchmark,在400-750nm、A=0-4.0時其重複性與線性均不大於3.5%。又如LABYSTEMS公司的Multi-skan Ascent,其吸光度讀數範圍達A=0-4.0,在A=3.0-4.0範圍,其線性不超過2%, RSD小於1.0%。
  • 擴展到紫外  增加紫外濾光片幾乎是廠商的共同選擇。由於各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉換的機構,可以同時安裝6-8片濾光片,擴展紫外功能相對容易,一般都增加340nm濾光片。
  • 具有孵育功能  可以自動、控製反應溫度,使微孔板的孵育過程在儀器內部完成,降低外界幹擾,簡化操作步驟。如BIORAD公司的Benchmark,芬蘭LABSYSTEMS公司的Multiskan  Ascent,BIOTCK公司的EIX808等。
  • 具有動力學檢測功能   常規ELISA是一種終點法 測量實驗,測量前需要加入終止液來抑製酶免反應的進行,通過吸光度的大小來計算待測物質的濃度,動力學方法是通過測定反應過程中吸光度的變化速率來計算相應的待測物質的含量的,酶標儀的測量速度加快後,隻要增加相應的軟件,就可以使用酶標儀完成某些生化指標的動力學測量。

洗板機是ELISA試驗保證洗滌效果、進而保證實驗質量的重要儀(yi) 器,洗板機的作用已不再是簡單的代替人的手工勞動的自動化裝置。目前國內(nei) 的洗板機除提供常規的設備清洗次數、清洗條數、浸泡時間等基本功能之外,還根據用戶的需要分別增加了底部衝(chong) 洗、兩(liang) 點吸液、板式/條式洗板、震蕩、位置調節及自動清洗管路、自動換液存儲(chu) 多種洗板程序等功能,清洗殘留量由原來的5-6UL/孔減小到2UL/孔,有的洗板機允許用戶對洗板過程的每一步的流量、時間、位置等進行詳盡的設定。生產(chan) 廠商根據各自對洗板技術的研究,努力提高儀(yi) 器可靠性與(yu) 自動化程度,同時為(wei) 用戶提供一個(ge) 合適、完善的洗滌環境。國內(nei) 洗板機就洗板效果、產(chan) 品可靠性等主要指標已達到進口以前的水平,與(yu) 進口儀(yi) 器相比,其價(jia) 格、售後服務占一定優(you) 勢,主要差距是無定量加液。

組合式的酶聯免疫儀(yi) 器

 組合式的酶聯免疫儀(yi) 器分三類:全自動酶聯免疫係統、自動樣品處理係統、流水線作業(ye) 式組合係統。前兩(liang) 者主要用於(yu) 各大血站、醫院,後者主要用於(yu) 試劑生產(chan) 廠商。

全自動酶聯免疫係統是將ELISA試驗中的各個(ge) 步驟,從(cong) 加樣、孵育、洗滌、震蕩、閉塞到定性或定量分析、報告存儲(chu) 與(yu) 打印功能全部集成在一台儀(yi) 器中,由儀(yi) 器按用戶事先設計的程序自動進行。HAMILTON公司的FAME(世界上台自動板式ELISA係統)、BIORAD公司的CAA、奧斯邦公司的AMP、TECAN公司的Minilyser、ORGANO公司的TEKTIME、意大利S.P.A. DIVISION  STRUMENTI的PersonaiLAB等全自動酶聯免疫係統已先後進入國內(nei) 市場。近兩(liang) 年新進入中國市場還有DYNDRX、公司的DSX、 阿克蘇公司的Flextk2、BIOASIA代理的TRITURUS等。全自動酶聯免疫係統的出現滿足了各大醫院、血站大批量重複檢驗的要求,提高了這些單位的檢查檢驗效率與(yu) 實驗水平,有效控製了大批量檢驗中極有可能出現的人工操作失誤,有利於(yu) ELISA實驗的質量保證與(yu) 提高,其國內(nei) 市場穩步增長。

自動樣品處理係統主要用於(yu) 完成ELISA實驗中的繁瑣無味、人工容易出錯的加樣、稀釋滴定、孵育、洗滌等步驟,完成之後再由酶標儀(yi) 判定結果。使用自動樣品處理係統利用原有的酶標儀(yi) ,既節約資金,又實現了實驗過程的自動化,是一種很經濟的方案。